[发明专利]一种利用丁基羟基茴香醚促进雨生红球藻生产虾青素的方法

权利要求书

1.一种利用丁基羟基茴香醚促进雨生红球藻生产虾青素的方法，包括以下步骤：

步骤1、藻液的制备：培养雨生红球藻到对数生长期后期，用缺氮的BBM培养基稀释藻液并获得诱导的藻液；

步骤2、诱导雨生红球藻积累虾青素：用DMSO配成128g L-1的丁基羟基茴香醚母液，将丁基羟基茴香醚母液添加到已经稀释好的诱导的藻液中使丁基羟基茴香醚浓度达到2-8mgL-1；然后将上述藻液在28℃、光强10000lx、冷光灯连续光照及氮饥饿的复合胁迫下进行培养，待藻体细胞完全变红后，收集藻细胞；

步骤3、利用有机溶剂提取藻细胞的虾青素。

2.根据权利要求1所述的利用丁基羟基茴香醚促进雨生红球藻生产虾青素的方法，其特征在于，所述雨生红球藻为雨生红球藻菌株。

3.根据权利要求1所述的利用丁基羟基茴香醚促进雨生红球藻生产虾青素的方法，其特征在于，所述步骤1中藻液的制备具体为：在25℃、光强3000lx，持续光照条件下培养，培养雨生红球藻到达对数生长期后期，此时细胞浓度达到106cells mL-1，利用缺氮的BBM培养基稀释到2×105cells mL-1作为诱导藻液。

4.根据权利要求1所述的利用丁基羟基茴香醚促进雨生红球藻生产虾青素的方法，其特征在于，所述步骤3中利用有机溶剂提取藻细胞的虾青素具体为：取5ml上述藻液，4000r/min离心5min，弃上清得藻细胞沉淀；分别向藻细胞沉淀中加入2mL 30％甲醇和5％KOH混合液，60℃水浴15min，4000r/min离心10min，除上清，沉淀加入纯水洗涤2次，除碱液残留；然后加入5mL DMSO，200w超声破壁15min，其中，超声1min，10s间歇，于45℃水浴20min，抽提至藻体发白，离心收集上清测OD490；并按照公式计算得出虾青素的含量，其中C为虾青素含量，A为490nm下OD值，Va为DMSO体积，Vb为藻液体积。