[发明专利]一种岩黄连的离体保存方法有效
| 申请号： | 201610108551.9 | 申请日： | 2016-02-29 |
| 公开（公告）号： | CN105746347B | 公开（公告）日： | 2018-09-25 |
| 发明（设计）人： | 张占江;李翠;郭晓云;赵以民;李林轩;缪剑华;韦莹;韦坤华 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区药用植物园 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 广西南宁明智专利商标代理有限责任公司 45106 | 代理人： | 黎明天 |
| 地址： | 530023 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 黄连 保存 方法 | ||
1.一种岩黄连的离体保存方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）不定芽诱导培养：取岩黄连茎尖作为外植体，在75%乙醇中浸泡30~45s，无菌水冲洗2~3次，投入添加2滴吐温的0.1%升汞4min，再用无菌水冲洗2~3次，再次投入添加2滴吐温的0.1%升汞4min，最后用无菌水冲洗2~3次后剪切为0.5~1.0cm长接种在诱导培养基上，培养10~14天，茎尖分化形成嫩黄绿色丛生芽；
（2）丛生芽壮苗生根培养：经25~35天，丛生芽长至2~3cm，转入壮苗生根培养基培养1个月后，长成具根和4~6片叶的试管苗；
（3）试管苗离体保存：将由丛生芽分化产生的具有4~6片叶的试管苗，接种到保存培养基进行离体保存；
步骤（1）中所述的诱导培养基为：MS+6-BA1.5mg/l+NAA0.5 mg/l +KT0.4mg/l+蔗糖2.5% +琼脂0.4%；所述培养基的pH值为5.8，培养温度为24~28°C，光照强度1400~2000lx，光照时间为12~14小时/天；
步骤（2）中所述的壮苗生根培养基为：MS+IAA0.6mg/l+6-BA0.3mg/l+ABT 0.5 mg/l +AC0.5%+蔗糖3.5%+琼脂0.4%；所述培养基的pH值为5.8，温度为22~25°C，光照强度2600~2800lx，光照时间为12~14小时/天；
步骤（3）中所述的保存培养基为1/2MS+ PPP3331.0mg/l +AC0.3%+蔗糖4.5%+琼脂0.4%；所述培养基的pH值为5.8，温度为21±1°C，光照强度1200~1600lx，光照时间为6~8小时/天。
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