[发明专利]一种藻油DHA提取制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及藻油DHA的提取方法，具体用于从微藻中提取DHA油脂。

背景技术

DHA在中枢神经系统、心血管系统和视觉神经系统等方面重要的生理功能， 已得到广泛的社会认可，世界多国已规定DHA可作为营养强化剂和食品添加剂 使用。目前，DHA已经被用于婴幼儿食品、乳品、饮料、豆奶及食用油脂等方面， 市场需求很大，因此，DHA的生产蕴藏着巨大商机。

DHA的来源主要是鱼油和藻油。鱼油有较大的鱼腥味和高含量EPA，在食品 添加上有一定的困难，食用人群也受到限制，并且鱼油资源有限。而大规模、 高密度培养的微藻异养发酵，可以解决上述问题。寇氏隐甲藻是生产DHA的高 产菌株，且脂肪酸组成简单，EPA较少，没有鱼腥味，具有非常广阔的应用前景。 目前，世界很多国家已有藻油商业生产的成功先例，但在我国，对隐甲藻的研 究还多停留在高产DHA藻株的筛选及发酵条件的优化上，大规模的工业化生产 较少且多为外资企业。因此，利用寇氏隐甲藻高密度发酵生产DHA的研究，具 有很大的经济效益和社会效应。

目前，现有微藻提取DHA的制备工艺较为落后，生产效率低，良品率低， 不能够高效的实现大规模的工厂化生产制备。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，公开了一种 藻油DHA提取制备方法，其通过发酵工艺、分离工艺及纯化工艺，从微藻中提 取DHA油脂并富集纯化DHA，有利于工厂化高效生产的实现；本发明可以进一步 将DHA藻油制成DHA藻油软胶囊，通过保健品的形式有助于人体健康水平的提 高。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

一种藻油DHA提取制备方法，包含如下步骤：

(1)将寇氏隐甲藻进行培养和发酵；所述培养和发酵为藻种培养和异养发 酵，得到微藻原料；

(2)干燥；将步骤(1)得到的微藻原料进行干燥处理，得到微藻粉末；

(3)破壁预处理；将步骤(2)得到的微藻粉末采用超声处理法进行微藻 破壁预处理，得到微藻干粉；

(4)微藻DHA提取；将步骤(3)得到的微藻干粉采用索氏提取法和/或超 临界二氧化碳萃取法进行微藻DHA提取，得到微藻油脂；

(5)尿素包合富集纯化；将步骤(4)得到的微藻油脂通过尿素包合法富 集纯化DHA；得到微藻DHA藻油；

(6)脱色除臭；将尿素包合富集纯化所得的微藻DHA藻油加入占油体质量 3％的活性白土进行脱色，脱色温度为80℃，脱色时间为45分钟，同时抽真空并 适度搅拌，过滤除去白土，对油脂进行水蒸气气提除臭，汽提温度为85℃，真 空度为0.30Kpa，脱臭时间为1小时，然后维持真空状态下缓慢冷却，离心得藻 油DHA成品。

本发明的优选实施方式和进一步的改进点如下：

一、

所述步骤(1)包含准备培养基以及异氧发酵的过程；

所述准备培养基包含,

(S11)固体培养基：

培养基组成：葡萄糖50g，味精30g，酵母膏6g，氯化钠8g，磷酸二氢钾 2g，硫酸镁6g，无水氯化钙0.5g，碳酸氢钠0.2g，A5溶液1ml，土浸液2ml， 纯净水1000ml；琼脂2％；

(S12)一级种子培养基：

培养基组成：葡萄糖20g，味精10g，酵母膏2g，氯化钠8g，磷酸二氢钾 2g，硫酸镁6g，无水氯化钙0.5g，碳酸氢钠0.2g，A5溶液1ml，土浸液2ml， 纯净水1000ml；

(S13)二级种子培养基：

培养基组成：葡萄糖40g，味精20g，酵母膏4g，氯化钠8g，磷酸二氢钾 2g，硫酸镁6g，无水氯化钙0.5g，碳酸氢钠0.2g，A5溶液1ml，土浸液2ml， 纯净水1000ml；

(S14)发酵培养基：

培养基组成：葡萄糖50g，味精30g，酵母膏6g，氯化钠8g，磷酸二氢钾 2g，硫酸镁6g，无水氯化钙0.5g，碳酸氢钠0.2g，A5溶液1ml，土浸液2ml， 纯净水1000ml；

(S15)菌种保藏培养基：

所述固体培养基或发酵培养基中添加有青霉素，添加量为50～100mg/L，并 低温保藏。

进一步的是：所述菌种保藏培养基为用于保藏寇氏隐甲藻的固体培养基。