[发明专利]用于治疗血管性痴呆的干细胞制剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于治疗血管性痴呆的干细胞制剂，其特征在于，包括骨髓间充质干细胞、Brdu、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子和人血白蛋白磷酸缓冲液。

2.根据权利要求1所述的用于治疗血管性痴呆的干细胞制剂，其特征在于，所述干细胞制剂中，所述骨髓间充质干细胞的浓度为(1～3)×10⁶个/ml。

3.根据权利要求1或2所述的用于治疗血管性痴呆的干细胞制剂，其特征在于，所述干细胞制剂中，

Brdu的浓度为5～15μmol/L、

表皮生长因子的浓度为2～10μg/ml、

成纤维细胞生长因子的浓度为2～20μg/ml，

以及人血白蛋白缓冲液的质量分数为0.5～2.0％。

4.根据权利要求1所述的用于治疗血管性痴呆的干细胞制剂，其特征在于，所述干细胞制剂中，

骨髓间充质干细胞的浓度为2×10⁶个/ml、

Brdu的浓度为10μmol/L、

表皮生长因子的浓度为6μg/ml、

成纤维细胞生长因子的浓度为11μg/ml，

以及人血白蛋白缓冲液的质量分数为1％。

5.根据权利要求1所述的用于治疗血管性痴呆的干细胞制剂，其特征在于，所述人血白蛋白缓冲液是由人血清白蛋白原液和PBS缓冲液混合制成的。

6.根据权利要求5所述的用于治疗血管性痴呆的干细胞制剂，其特征在于，所述人血白蛋白缓冲液中，人血清白蛋白原液和PBS缓冲液的体积比为(0.5～2)：1。

7.一种如权利要求1～6任一项所述的用于治疗血管性痴呆的干细胞制剂的制备方法，其特征在于，

获取骨髓间充质干细胞的过程包括以下步骤：

采集骨髓，肝素抗凝，在percoll分离液中离心，取中层单核细胞，PBS缓冲液离心洗涤，弃上清液，即收获原代骨髓间充质干细胞；

将原代骨髓间充质干细胞浓度调整至1×10⁶～1×10⁸个/25ml，加入血清培养基进行培养；当细胞生长至融合时，PBS漂洗，加入胰蛋白酶，见胞质回缩，细胞间隙增大后，加入含胎牛血清的DMEM培养基终止消化，按1：2～1：3比例接种进行传代培养至细胞生长到融合，继续传代至获得第3～5代中任一代骨髓间充质干细胞，胰酶消化后，离心清洗。

8.根据权利要求7所述的用于治疗血管性痴呆的干细胞制剂的制备方法，其特征在于，所述血清培养基中添加有10^-6～10^-8mol/L的氢化可的松、80-120U/ml的青霉素及80-120mg/ml的链霉素。

9.根据权利要求1～8任一项所述的干细胞制剂在制备治疗血管性痴呆的药物中的应用。