[发明专利]烟叶中角鲨烯的检测方法

权利要求书

1.一种烟叶中角鲨烯的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.样品前处理得到样品液，在经过硅胶净化处理后得到样品待测液；

S2.配制标准溶液，建立标准曲线；

S3.检测：吸取样品待测液注入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器检测角鲨烯；

S4.采用外标法，根据吸收峰面积计算其含量；

其中，步骤S1所述样品前处理包括以下步骤：

S11.烟叶切丝，以三氯甲烷作为提取溶剂，经索氏提取得到提取液；

S12.将提取液经甲醇：水的体积比为70:30的萃取剂进行萃取，收集萃取液，进行旋转蒸发至近干，再用乙腈溶解，过0.22μm有机系膜，收集滤液得到样品液；

S13.将步骤S12所得样品液过小柱净化处理，采用湿法装柱，小柱材料为0.06gPSA和适量无水硫酸钠；

步骤S3所述检测的条件为：

Agilent1100高效液相色谱仪HPLC配紫外检测器；

色谱柱：C18，5μm，4.6×250mm；

柱温：30℃；

流动相类型：甲醇∶乙腈，体积比为75/25；

流动相流速：1mL/min；

检测波长为：210nm；

进样量：10μL。

2.根据权利要求1所述烟叶中角鲨烯的检测方法，其特征在于，步骤S2所述配制标准溶液的方法是准确称取0.1g角鲨烯标准品，精确至0.0001g，用乙腈溶解后定容至100mL配制成1000mg/L的角鲨烯标准溶液，充分振荡摇匀。

3.根据权利要求1所述烟叶中角鲨烯的检测方法，其特征在于，步骤S2所述角鲨烯标准曲线的建立的方法是：采用系列稀释法，分别配制成浓度为0.002、0.01、0.05、0.2、0.5mg/mL的角鲨烯标准溶液于高效液相色谱进样检测；以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标建立标准曲线，求出角鲨烯浓度与相应峰面积的线性回归方程。

4.根据权利要求1所述烟叶中角鲨烯的检测方法，其特征在于，步骤S11在加入三氯甲烷之前，先对烟丝进行涡旋处理，所述涡旋处理是涡旋1min，静止10min。

5.根据权利要求4所述烟叶中角鲨烯的检测方法，其特征在于，所述涡旋处理的条件为2000r/min。

6.根据权利要求1所述烟叶中角鲨烯的检测方法，其特征在于，步骤S11所述三氯甲烷的用量按照与烟丝的比例为5.0g烟丝：200mL三氯甲烷确定。

7.根据权利要求1所述烟叶中角鲨烯的检测方法，其特征在于，步骤S11所述所述索氏提取的条件为40℃水浴，回流9个小时。

8.根据权利要求1所述烟叶中角鲨烯的检测方法，其特征在于，步骤S12所述萃取剂的用量按照其与提取液体积比为1:1确定。

9.根据权利要求1所述烟叶中角鲨烯的检测方法，其特征在于，步骤S12所述萃取的次数为3次。

10.根据权利要求1所述烟叶中角鲨烯的检测方法，其特征在于，步骤S13所述无水硫酸钠为0.5g。