[发明专利]4-[(2-氯乙基-2-羟乙基)氨基-]-L-苯丙氨酸盐酸盐的制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及4-[(2-氯乙基-2-羟乙基)氨基-]-L-苯丙氨酸盐酸盐(即单羟基美法仑盐酸盐)的制备方法与应用，单羟基美法仑盐酸盐是盐酸美法仑原料或制剂工艺中的重要杂质。

背景技术

美法仑(Melphalan)，又叫4-(双(2-氯乙基)-氨基)-L-苯丙氨酸)及其盐酸盐是已知的抗肿瘤药。1964年1月17日，2mg美法仑片剂在美国上市，其活性成分为美法仑；1992年11月18日，盐酸美法仑注射剂ALKERAN在美国上市，活性成分为美法仑盐酸盐。由于苯丙氨酸基团的存在，其易于进入肿瘤细胞内发生作用，从而有效地抑制和阻止恶性肿瘤细胞的增生和成熟。美法仑及其盐酸一盐的应用十分广泛，可用于多发性骨髓瘤、乳腺癌、卵巢癌、慢性淋巴细胞和粒细胞型白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤。

盐酸美法仑的化学结构式如式1所示：

美法仑及其类似物结构中的氯原子属于易离去基团，操作复杂且制备周期过长易使氯乙基降解成羟乙基，生成双羟基美法仑(式3所示)或单羟基美法仑盐酸盐(式2所示)；使得最终产品质量难以保证。

对美法仑、盐酸美法仑原料和制剂的质量控制，必须有质量合格的杂质对照品。关于单羟基美法仑盐酸盐(式2所示化合物)，目前暂未检索到该化合物的具体制备。因此有必要开发一种稳定、便捷、纯度高的制备单羟基美法仑的方法。

本发明的4-[(2-氯乙基-2-羟乙基)氨基-]-L-苯丙氨酸盐酸盐为盐酸美法仑杂质，可以作为杂质对照品控制盐酸美法仑原料或制剂的纯度。

发明内容

本发明一方面提供了式2化合物的制备方法，其化学结构式如式2所示，化学名为4-[(2-氯乙基-2-羟乙基)氨基-]-L-苯丙氨酸盐酸盐。

专利US3032584涉及美法仑化合物专利，其制备方法，公开了以4-硝基苯丙氨酸或L-4-硝基苯丙氨酸为原料合成美法仑。在该合成方法中，首先要对原料的氨基酸部分进行保护(乙酯化保护羧基；苯酐保护氨基)得到一个较稳定的全保护物，将对位的硝基部分修饰后，再通过加氢气还原，羟乙基化，氯化三步反应得到美法仑的有效基团氮芥，最后采用盐酸回流的方法对氨基酸部分进行脱保护，得到美法仑产品。

本发明是在参考上述专利US3032584制备得到盐酸美法仑的基础上，开发出的盐酸美法仑杂质—单羟基美法仑盐酸盐的合成新方法，通过一步水解和纯化得到单羟基美法仑，解决了该杂质获得的便捷性和稳定性；尤其重要的是，本发明对单羟基美法仑纯化方法进行了详细研究，筛选出了更加稳定的柱层析分离条件，单羟基美法仑HPLC纯度可达95％以上。本发明的制备条件温和可控，可快捷方便地制备得到单羟基美法仑。

单羟基美法仑的制备步骤：(1)将式1的美法仑在反应溶液中进行水解反应；(2)水解反应后再通过柱层析方法分离得到单羟基美法仑，浓缩、冷冻干燥得到单羟基美法仑盐酸盐。

进一步地，步骤(1)中所述的反应溶液为水或碱性溶液。

进一步地，所述的碱性溶液选自碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、碳酸氢钾、碳酸氢钠、氢氧化钾或氢氧化钠的一种或几种的水溶液，碱性溶液重量百分浓度不大于5％。

进一步地，步骤(1)中所述水解反应温度为25-70℃，反应时间为1-3h。

进一步地，步骤(2)中所述柱层析方法使用十八烷基硅烷键合硅胶(ODS-C₁₈)进行分离，流动相选自乙腈与稀盐酸、甲醇与盐酸的混合液。

更进一步地，盐酸的pH为1～5。

更进一步地，盐酸的pH为2～3。

本发明制备的化合物4-[(2-氯乙基-2-羟乙基)氨基-]-L-苯丙氨酸盐酸盐可作为盐酸美法仑的有关物质检测用对照品，用于盐酸美法仑及其相关制剂的质量控制。

本发明中所述的稀盐酸为浓盐酸和水混合后所得到的氯化氢水溶液，其摩尔浓度不大于12mol/L。本发明中稀盐酸浓度控制在10^-1～10^-5mol/L之间，其pH值为1～5。

本发明采用的技术方案的有益效果是操作便捷，反应条件温和可控，大大提高反应的稳定性，反应产物收率高、纯度高。

具体实施方式

本发明将于下文通过实施例更加详细的描述，这些实施例示例性地用于进一步说明，且不应当视为对本发明的限制。

单羟基美法仑盐酸盐的制备

实施例1：