[发明专利]反映男性精子活力的精浆piRNA标志物或其组合及应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及反映男性精子活力的精浆piRNA标志物或其组合及应 用。

背景技术

不孕不育已成为全世界范围内的生殖健康问题。据不完全统计，目前全世界约有1.86 亿人被不孕不育问题困扰，其中由于男性因素造成的不育占据一半左右，且近几年呈上升 趋势(1)。近75％的男性不育患者被诊断为先天性自发，然而造成男性不育的分子机制尚不 清晰(2)。目前临床生殖实验室检查项目一般包括对精液的生化检查，酸性磷酸酶、乳酸脱 氢酶-X等酶类检查以及精液免疫学检查，但这些技术都存在一定缺陷，不能直接反映睾丸 的生精功能和全面评价精液质量，也无法解释造成男性不育的分子机制(3)。弱精症是男性 不育疾病中的一种，弱精症是指精液参数中前向运动的精子(a和b级)小于50％或a级运 动的精子小于25％的病症，弱精子症又称精子活力低下。然而临床上针对这种疾病的检测很 难精确反映男性精子的活力程度，难以直接判定精子活力的低下程度及其导致的男性不育。 由于精子活力在男性生殖中起到至关重要的作用，所以目前急需寻找一种比现有方法更精 确的方法来直接反映精子活力。

piRNA是2006年在动物生精细胞中发现的一类新型小分子非编码RNA，因为它们特异 性地与PIWI蛋白质相互作用，所以被命名为PIWI互作RNA(PIWI-interactingRNA)， 简称piRNA(4-7)。piRNA与生殖密切相关，这不仅因为piRNA特异性的在生殖世系细胞中 高表达，而且piRNA参与了精子的形成和调控，包括对精子成熟相关基因进行转录后调控 以及对逆转录转座子进行抑制等等(4，8)。因此，piRNA突变失去功能后，常常会导致个体 不育(9)。

因此，通过对这些piRNA进行研究，有望发现一些与男性生殖功能(如精子活力等) 密切相关的piRNA，以其作为生物标志物将有望开发出反映男性精子活力的指标，从而应用 于男性生殖功能障碍的临床诊断、预测和筛查。

发明内容

本发明的目的是筛查反映男性精子活力的精浆piRNA，通过测量精浆piRNA特异性变 化，筛选出精子活力弱的生殖功能障碍的男性的精浆piRNA谱图，然后通过数学分析方法 计算危险系数评分(RiskScore)以及区分标准(Cut-offValue)，从而给每个病人打分 并评估其危险系数(高危险系数代表精子活力弱并伴随生殖功能障碍)，最终为精确定量男 性精子活力程度及鉴别因精子活力低下导致的弱精症提供新的渠道和指标。精浆piRNA作 为新的反映男性精子活力的生物标志物具有重要的指导意义，能显示出分子水平的遗传信 息，有助于揭示男性精子活力降低的分子机制。

本发明的上述目的是采用以下技术方案来实现的：

一种与男性精子活力弱及生殖功能障碍相关的piRNA标志物或其组合，包括下列piRNA 中的任意一种或几种：DQ570956、DQ571813、DQ575659和DQ575661。其中所述的男性生殖 功能障碍选自弱精症。