[发明专利]一种球形节杆菌及其产生的透明质酸酶

权利要求书

1.一种球形节杆菌，其特征在于其分类命名为球形节杆菌Arthrobacter globiformisA152，其保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏日期：2015年10月29日，保藏编号：CCTCCM 2015649；菌株球形态时细胞直径为0.6-0.8μm，杆形态时细胞直径为0.5-0.8μm×1-4μm，菌落淡黄色，呈圆形，边缘光滑。

2.权利要求1所述的球形节杆菌变温调控生产的透明质酸酶，其特征在于它通过以下制备方法制得：

（1）将斜面菌种接种到已灭菌的种子培养基中，在培养温度31℃-37℃、转速120-180rpm的条件下培养16-48h，获得种子培养液；

（2）将种子培养液接种到已灭菌的发酵培养基中，在培养温度18℃-30℃、转速120-180rpm的条件下培养16-48h，获得透明质酸酶发酵液；

（3）离心或过滤分离所述透明质酸酶发酵液，取上清液；

（4）用硫酸铵沉淀所述上清液，离心或过滤收集粗蛋白；

（5）缓冲液复溶步骤（4）收集的粗蛋白，超滤或透析除去小分子杂质，得到纯化的透明质酸酶。

3.根据权利要求2所述的透明质酸酶，其特征在于：制得的所述透明质酸酶的分子量为73.7 kDa。

4.根据权利要求2所述的透明质酸酶，其特征在于：所述制备方法还包括步骤（6）：将步骤（5）中得到的透明质酸酶利用QFF离子交换色谱或Sephadex G100凝胶过滤色谱精制，得到电泳纯的透明质酸酶。

5.根据权利要求2所述的透明质酸酶，其特征在于：所述制备方法还包括步骤（6）：将步骤（5）得到的透明质酸酶进行真空冷冻干燥。

6.根据权利要求4所述的透明质酸酶，其特征在于：所述制备方法还包括步骤（7）：将步骤（6）得到的透明质酸酶进行真空冷冻干燥。