[发明专利]一种快速提取植物组织总RNA的方法

权利要求书

1.一种快速提取植物组织总RNA的方法，其特征是，包括以下步骤：

1）研钵洗净后，用酒精灼烧研钵，然后用液氮迅速预冷，将交联聚乙烯基吡咯烷酮（PVPP）和植物组织按照1:1~1:5（w/w）的比例置于上述研钵中，并用液氮研磨成粉末；取0.1-0.3g的上述粉末置于2ml离心管中，加入10μlβ-巯基乙醇和1ml预热CTAB提取液，震荡混匀，于55-68℃下水浴20-30分钟，冷却至室温；

2）在步骤1）所述的离心管中直接加入1ml氯仿，充分震荡后，常温下，12000rpm离心5min；取上清，加入等体积氯仿，充分震荡后，4℃，12000rpm离心10min，取上清，按照同样的条件重复抽提一次；

3）取上清，加入等体积8MLiCl，常温下沉淀1-2h，12000rpm离心10min，彻底弃上清，保留沉淀；

4）在上述沉淀中加入75%乙醇浸泡5-10min，上下颠倒洗涤，8000rpm离心5min，彻底弃上清，重复洗涤1-2次，所得沉淀于室温下风干10-15min至无酒精残留，再加入20-30μlDEPC处理水溶解，-20℃保存。

2.根据权利要求1所述的快速提取植物组织总RNA的方法，其特征是，所述交联聚乙烯基吡咯烷酮和植物组织的质量比为1:1（w/w）。

3.根据权利要求1所述的快速提取植物组织总RNA的方法，其特征是，所述植物组织为植物的根、茎、叶、花、果实或种子。

4.根据权利要求1所述的快速提取植物组织总RNA的方法，其特征是，所述CTAB提取液配方为：

3%CTAB，2%PVP，200mMTris-HCl(pH8.0)，50mMEDTA，1.4MNaCl。