[发明专利]一种检测人心力衰竭新型标志物ST2的快速诊断试剂盒

说明书

本申请是申请人于2012年8月10日提交的题为“一种检测人心力衰竭新型标志物ST2的 快速诊断试剂盒”的中国专利申请201210288223.3的分案申请。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种快速定性/定量检测人全血、血清和/或血浆 中心力衰竭标志物人可溶性ST2浓度的快速诊断检测试剂盒。

背景技术

心力衰竭是一种复杂的临床症状群，是各种心脏病的严重阶段，其发病率高，五年 存活率与恶性肿瘤相仿。据我国五十家医院住院病例调查，心力衰竭住院率占同期心血管 病的20％，死亡率却占40％，提示预后严重。就整个欧洲来说，估计有症状的心力衰竭病人 占总人口的0.4％-2％，随着年龄的增加，心力衰竭的患病率迅速增加。心力衰竭已经成为 美国主要的公共卫生问题。美国患有心力衰竭的病人大约有500万人，每年新增50万人。每 年因心力衰竭而就诊者达到1200-1500万，总住院天数达到650万。

ST2是白介素-1(IL-1)受体家族成员之一，有跨膜ST2(ST2L)和可溶性ST2(sST2) 两种，白介素-33(IL-33)是ST2L的功能配体。心肌细胞和纤维原细胞受到机械牵张后，ST2 和IL-33产生增加。近年研究发现ST2水平升高和BNP或NT-proBNP一样，可以反映心脏的负 荷。

在急性心肌梗死患者，TIMI14和TIMI23研究中的810例患者进行了外周血ST2水 平测定，结果发现30天内死亡和发生心衰的患者外周血ST2水平显著升高。在急性呼吸困难 患者，Januzzi等对593例急诊患者的研究发现，心衰患者ST2的中位数高于非心衰患者，并 且1年内死亡的患者ST2中位数也高于存活的患者，ST2水平的升高是1年死亡率的独立和强 力预测指标。还有研究在慢性心衰患者发现，ST2水平的升高和心衰严重程度相关并预测心 脏猝死的发生，并且严重心衰患者升高ST2在2周时的变化也是死亡和需要心脏移植的独立 预测指标。

SaskiaBoisot等对150名急性不稳定HF住院患者进行研究，通过应用与心脏相关 的多参数(包括ST2，BNP，NT-proBNP及血尿素氮)进行分析后发现，患者住院期间的ST2水平 变化可预测90天时死亡率，且该作用独立于BNP和NT-proBNP。

总之，人可溶性ST2作为生物标志物已反复被证实具有潜在的价值。测量急性呼吸 困难或心肌梗死的急诊患者血清ST2水平可能为分层护理提供一些有用的预后信息。另外， ST2的预测价值不受年龄、肾功能损害和体重指数的影响，而BNP、NT-proBNP的检测通常受 到这些因素的影响，因此，ST2的测定结合BNP或NT-proBNP的测定可以更好的提高心衰预后 判断的准确性。

发明内容

本发明涉及一种快速定性/定量检测人全血、血清和/或血浆，尤其是外周血中心 力衰竭标志物-人可溶性ST2的胶体金试纸条检测试剂盒。本试纸条可对人心力衰竭标志 物-人可溶性ST2进行定性/定量检测，具有较高的特异性和灵敏度，操作简捷，也可以用配 套仪器进行定量检测。

本发明的另一个目的是在于提供了一种人心力衰竭标志物-人可溶性ST2免疫快 速诊断试纸条的制备方法，包括抗可溶性ST2特异性抗体和/或抗原特异片段的制备、ST2免 疫检测试纸条的制备及其检测方法和/或使用。该试纸条操作简捷、快速、高效、准确，全过 程只需要10分钟，不受环境条件干扰，特异性好，且检测灵敏度高，最低检测级别可为ng/ ml。本发明适用于医院和急诊单位等，可实现心力衰竭等心肌疾病的快速检测和/或现场检 测。

本发明的检测人可溶性ST2免疫胶体金试纸条由样品垫、涂覆胶体金标记的抗-人 可溶性ST2抗体的金标垫、在检测线和质控线包被有抗-人可溶性ST2抗体和IgG的硝酸纤维 素膜、吸水垫依次构成(见图1)。在该PVC底板的两端，分别设有样品垫和吸收垫；在该PVC底 板中部设有硝酸纤维素膜检测层，在硝酸纤维素膜检测层与样品垫交界处，设有包被金标 记抗-人可溶性ST2抗体的金标垫，在金标垫一端部分设置在样品垫之下，另一端部分设置 在检测层之上；在与样品垫延续的检测层上设有检测线和质控线，在该检测线和质控线上 分别包被有抗-人可溶性ST2抗体和羊抗IgG。