[发明专利]从红豆杉中高效快速提取紫杉醇、三尖杉宁碱和10-DABⅢ的方法

说明书

技术领域

本发明涉及从植物中分离提取有效成分的技术领域，具体涉及一种从红豆 杉中高效快速提取紫杉醇、三尖杉宁碱和10-DABⅢ的方法。

背景技术

紫杉烷类化合物是提取于高等裸子植物红豆杉的树皮、根和叶等部位的一 类化合物，主要含有紫杉醇、三尖杉宁碱、10-DABⅢ、7-木糖基紫杉醇等，有 许多已被证明具有细胞毒性和抗肿瘤活性，而用来提取紫杉醇等的天然红豆杉 资源有限，因而天然紫杉醇原料药的生产和供应受到限制，远远不能满足紫杉 醇临床的应用。现在人们大规模种植红豆杉树，从中提取紫杉醇、三尖杉宁碱、 10-DABⅢ、7-木糖基紫杉醇等紫杉烷类物质，如何充分利用资源红豆杉资源， 从中得到更多的有效物质具有重要意义。现有提取紫杉烷类有效成分的方法， 如授权公告号为CN103408512B的“一种从红豆杉中高效提取紫杉烷类有效成 分的方法”专利，公开的提取紫杉烷类有效成分的方法是：先通过水提取，再 通过醇提取，再用传统纯化方法纯化即可得到紫杉醇、10-DABⅢ、7木糖基紫 杉醇、三尖杉宁碱非水溶性等紫杉烷类物质单体。该方法的主要缺点是：①提 取时间较长，在4～48小时；②经提取罐下部滤板过滤后的滤液中含有很多细 小颗粒，进入树脂柱会堵塞树脂柱，降低树脂柱的循环使用次数；③采用有机 弱酸水溶液进行提取增加了后续处理有机弱酸水溶液的步骤。

因此，需要一种从红豆杉中高效快速提取紫杉醇、三尖杉宁碱和10-DABⅢ 的方法，具有制备工艺和生产设备以及操作步骤简单，提取时间较短，材料可 循环，且使用时间长等特点。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种从红豆杉中高效快速提取紫杉醇、 三尖杉宁碱和10-DABⅢ的方法，具有制备工艺和生产设备以及操作步骤简单， 提取时间较短，材料可循环，且使用时间长等特点。

本发明的从红豆杉中高效快速提取紫杉醇、三尖杉宁碱和10-DABⅢ的方法， 包括以下步骤：

a.将红豆杉粉末溶于10-DABⅢ提取剂进行超声提取后经离心分离收集离心 清液Ⅰ，将离心清液Ⅰ经大孔树脂饱和吸附后进行洗脱收集洗脱液Ⅰ进行浓缩， 得到10-DABⅢ浸膏，经大孔树脂处理后的离心清液Ⅰ经超声提取后收集滤渣和 滤液；

b.将步骤a中收集的滤渣溶于紫杉醇提取剂先后经超声提取和离心分离后 收集离心清液Ⅱ，将离心清液Ⅱ经大孔树脂饱和吸附后进行洗脱收集洗脱液Ⅱ 进行浓缩，得到含有紫杉醇、三尖杉宁碱的浸膏；

进一步，步骤a中，红豆杉粉末与10-DABⅢ提取剂的质量体积比为1∶5～ 100；

进一步，步骤a中，第一次超声提取的超声频率为为20～50KHz，提取时间 为2-6小时；

进一步，将步骤a中第二次超声提取后的滤液作为10-DABⅢ提取剂循坏使 用；

进一步，步骤a中，所述10-DABⅢ提取剂为水；采用浓度为40～60％的甲 醇或40～60％的乙醇作为洗脱剂进行洗脱；在转速为6000～20000r/min的管式 离心机中进行离心分离处理；

进一步，步骤b中，按照红豆杉粉末与紫杉醇提取剂的质量体积比为1∶5～ 100的比例，向滤渣加入紫杉醇提取剂，所述紫杉醇提取剂为浓度20～50％的甲 醇或20～50％的乙醇；

进一步，步骤b中，超声提取频率为20～50KHz，时间为2-6小时；

进一步，步骤b中，采用浓度为60～99.5％的甲醇或60～99.5％的乙醇进行 洗脱；

进一步，步骤b中，在转速为6000～20000r/min的管式离心机中进行离心 分离处理得到离心清液Ⅱ；经大孔树脂处理后的离心清液Ⅱ经超声提取后收集 滤液作为紫杉醇提取剂循环使用；

进一步，将曼地亚红豆杉枝叶进行阴干然后粉碎至0.1～2mm，就制得红豆 杉粉末；将步骤a中的10-DABⅢ浸膏和步骤b中的紫杉醇、三尖杉宁碱浸膏纯 化制得紫杉醇、三尖杉宁碱和10-DABⅢ。