[发明专利]聚2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱包载的尼妥珠单抗纳米微囊及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明属于含有抗原或抗体的医药配制品领域，具体是一种聚2-甲基丙烯酰氧乙 基磷酸胆碱包载的尼妥珠单抗纳米微囊及其制备方法和用途。

背景技术

胶质母细胞瘤是最常见的颅内原发性恶性肿瘤，具有高度的侵袭性，目前其治疗 方式包括手术切除，及辅助性术后放射及替莫唑胺化学治疗，但生存期通常不足15个月。近 年来，随着对肿瘤发生发展机制的认识和分子生物学技术的进步，目前临床已经开始针对 细胞受体、关键基因和调控分子为靶点的分子靶向治疗。而其中的热点，主要是针对表皮生 长因子受体(EGFR)为靶点的治疗。EGFR是一跨膜糖蛋白受体，由细胞外的配体结合区，跨膜 区及细胞内酪氨酸激酶活性区组成，当配体于胞外的配体结合区结合后，受体可发生同二 聚或异二聚作用，激活胞内酪氨酸激酶的活性，并进一步激活下游的信号传导通路。因 EGFR的信号传导机制和肿瘤的恶性表型，正常细胞凋亡的抑制，血管生成，以及肿瘤的转移 均有密切的联系，提示它可以作为药物的治疗靶向。目前，全球已经有三种针对EGFR的单 克隆抗体上市，已经取得了明显的效果。此三种抗体为尼妥珠单抗(Nimotuzumab)，西妥昔 单抗(Cetuximab)，帕尼单抗(Panitumumab)。尼妥珠单抗是针对EGFR的人源化IgG1型 单克隆抗体药物，通过与EGFR胞外区域3A表位结合，竞争性抑制配体与EGFR的结合，使 受体失去活性，从而达到抑制肿瘤细胞的作用。但是，治疗抗体存在着分子量大、跨血脑屏 障效率低、血液中稳定性差和循环时间短等问题。

原位聚合法是从纳米复合材料中发展而来的，就是把反应单体填充到纳米层状物 的层间，让其在层间发生聚合反应。其反应机理是把反应性单体与催化剂全部加入分散相 中，由于分子间作用力或其他作用，单体可以在芯材附近富集，在催化剂作用下聚合反应在 分散相芯材上发生。

发明内容

本发明就是为了解决目前胶质瘤抗体药物血药半衰期短，免疫源性，分子量大，不 易透过血脑屏障的问题，所提出的一种聚2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱包载的尼妥珠单抗 纳米微囊及其制备方法和用途。

本发明是按照以下技术方案实现的。

一种聚2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱包载的尼妥珠单抗纳米微囊，是由聚2-甲基 丙烯酰氧乙基磷酸胆碱与尼妥珠单抗聚合而成的表面圆滑，粒径均一，粒径为30±5nm，表 面电荷为2.3mV，具有脑肿瘤靶向高效投递作用的纳米微囊。

一种上述聚2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱包载的尼妥珠单抗纳米微囊的制备方 法，包括以下步骤：

a.取0.1-100mg尼妥珠单抗溶液；

b.按照尼妥珠单抗溶液与含碳碳双键的单体的摩尔比为1:100-1:100000的比例加入 含碳碳双键的单体；

c.按照尼妥珠单抗溶液与交联剂的摩尔比为1:100-1:10000的比例加入酶可降解的多 肽交联剂，利用静电和氢键作用，在尼妥珠单抗的周围富集碳碳双键单体以及交联剂；

d.按照尼妥珠单抗溶液与引发剂的摩尔比为1:100-1:10000的比例加入引发剂，在4 ℃，引发剂的引发下，通过原位聚合的方法获得聚2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱包载的尼 妥珠单抗纳米微囊，反应时间为0.1-24小时。

步骤b中所述的含碳碳双键的单体为N-(3-氨基丙基)甲基丙烯酸盐和2-甲基丙烯 酰氧乙基磷酸胆碱，两种单体的摩尔比为0.0001:1-1:10000。

步骤c中所述交联剂为酶敏感交联剂、pH敏感交联剂、或氧化还原敏感交联剂。

所述酶敏感交联剂为基质金属蛋白酶-2可降解的多肽交联剂；pH敏感交联剂为二 甲基丙烯酸乙二醇酯；氧化还原敏感交联剂为含二硫键交联剂。

步骤d中所述的引发剂为过硫酸铵和四甲基乙二胺，两者的摩尔比为0.01:1-1: 100。

一种上述聚2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱包载的尼妥珠单抗纳米微囊在制备肿 瘤靶向治疗药物中的应用。

本发明获得了如下的有益效果。