[发明专利]齿瓣石斛均一多糖的分离纯化及一级结构鉴定方法

权利要求书

1.一种分离提纯齿瓣石斛均一多糖的方法，其特征在于将水提醇沉粗多糖先用分步醇沉方法进行分离，然后经凝胶柱纯化，得到齿瓣石斛的均一多糖；

其中，采用分步醇沉方法进行分离包括：将粗多糖复溶于水，加酒精至50％进行乙醇醇沉，得到沉淀物，将该沉淀物去除，继续加酒精至体系酒精70％，得到絮状沉淀，该絮状沉淀为50-70％醇沉粗多糖片段；

凝胶柱纯化包括：将50-70％醇沉粗多糖片段复溶于水，用凝胶柱进行纯化，用硫酸苯酚法跟踪监测收集，蒸发浓缩，透析，冷冻干燥，得到凝胶柱分离纯化过的均一多糖；

通过核磁分析推断所提纯齿瓣石斛均一多糖的糖苷键→4)-man-(1→，→4)-Glc-(1→和→4)-2-o-acetyl-man-(1→的比值为：1.46:1.74:1.00，齿瓣石斛中的主要多糖为乙酰基葡甘露聚糖；

所述均一多糖的分子量为1.94×10⁵Da；

其单糖摩尔比组成为：甘露糖:葡萄糖＝0.77:0.23。

2.如权利要求1所述分离提纯齿瓣石斛均一多糖的方法，其特征在于，所述50-70％醇沉粗多糖片段的纯度在90％以上。

3.如权利要求1所述分离提纯齿瓣石斛均一多糖的方法，其特征在于采用superdex-200凝胶柱进行纯化；收集对称峰33-45管；采用旋转蒸发仪浓缩，浓缩时间40-80分钟。

4.如权利要求1所述分离提纯齿瓣石斛均一多糖的方法，其特征在于水提醇沉粗多糖包括：将齿瓣石斛在水中煎煮，并进行固液分离，所得液体为水提液；向水提液中加入乙醇醇沉，使体系内乙醇浓度为70％-80％，得到粗多糖。