[发明专利]一种高得率的灰树花多糖酶提方法

权利要求书

1.一种高得率的灰树花多糖酶提方法，其特征为，其方法如下：

（1）预处理：将灰树花清洗干净，置于50~70℃下烘干，烘干后投入粉碎机粉碎，随后过20~60目筛网制得灰树花粉末；

（2）配液：将灰树花粉末投入蒸馏水中，所述灰树花粉末的重量与蒸馏水的体积比为1:（15~20）（g/ml），控制搅拌速率为80~120r/min搅拌20~30min，制得浸提原液；

（3）一次酶解：在浸提原液中加入缓冲液，将浸提原液的PH调至4.00~4.50，随后投入反应釜中，在反应釜中加入纤维素酶，控制反应釜温度为32~38℃，搅拌速率为60~80r/min，进行一次酶解反应1~2h；

（4）一次酶灭活：将一次酶解反应结束后的溶液升高温度至60~80℃，并保持8~10min，进行一次酶灭活，随后冷却至室温制得一次浸提液；

（5）二次酶解：在一次浸提液中加入稀酸，将一次浸提液PH调至2.50~3.00，随后投入反应釜中，在反应釜中加入果胶酶，控制反应釜温度为40~55℃，搅拌速率为50~70r/min，进行二次酶解反应2~3h；

（6）二次酶灭活：将二次酶解反应结束后的溶液升高温度至100~110℃，并保持5~7min，进行二次酶灭活，随后冷却至室温制得二次浸提液；

（7）三次酶解：在二次浸提液中加入稀碱，将二次浸提液的PH调至3.50~4.00，随后投入反应釜中，在反应釜中加入菠萝蛋白酶，控制反应釜温度为50~60℃，搅拌速率为90~100r/min，进行三次酶解反应1~2h；

（8）三次酶灭活：将三次酶解反应结束后的溶液升高温度至110~120℃，并保持8~10min，进行三次酶灭活，随后冷却至室温制得三次浸提液；

（9）减压浓缩：将三次浸提液控制压力为0.1MPa，温度为60~70℃，进行减压浓缩，浓缩至200℃热测比重为1.130~1.185，得浓缩物；

（10）过滤：将浓缩物通过膜过滤，取上层固体；

（11）真空干燥：将上层固体在真空度为-0.1MP，干燥温度为30~40℃下干燥20~30min，制得灰树花多糖。

2.如权利要求1所述的一种高得率的灰树花多糖酶提方法，其特征为，所述缓冲液由浓度为0.2mol/L的磷酸氢二钠和浓度为0.1mol/L的柠檬酸，按体积比8:11混合均匀，配制而成。

3.如权利要求1所述的一种高得率的灰树花多糖酶提方法，其特征为，所述纤维素酶为纤维素酶xm90a，所述纤维素酶的添加质量占浸提原液质量的1~2%。

4.如权利要求1所述的一种高得率的灰树花多糖酶提方法，其特征为，所述稀酸为稀盐酸或稀柠檬酸中的一种。

5.如权利要求1所述的一种高得率的灰树花多糖酶提方法，其特征为，所述果胶酶为果胶酶Y23，所述果胶酶的添加质量占一次浸提液的1~2%。

6.如权利要求1所述的一种高得率的灰树花多糖酶提方法，其特征为，所述稀碱为稀氢氧化钠或稀碳酸氢钠中的一种。

7.如权利要求1所述的一种高得率的灰树花多糖酶提方法，其特征为，所述菠萝蛋白酶为食品级菠萝蛋白酶，所述菠萝蛋白酶的添加质量占二次浸提液的0.5~1.5%。