[发明专利]一种健脾温中、散寒止泻的药物组合物中有效成分的测定方法及指纹图谱建立方法

权利要求书

1.一种健脾温中、散寒止泻的药物组合物指纹图谱的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备

称取桂皮醛对照品，加入浓度为100％的甲醇制得对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备

取所述药物组合物，粉碎，过筛，加入浓度为75％的甲醇溶液，提取1～2小时，放至室温，加入浓度为75％的甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，即得供试品溶液；

(3)测定法：

吸取所述对照品溶液和所述供试品溶液，注入高效液相色谱仪，得到色谱图，

其中，所述高效液相色谱仪的色谱条件如下：

色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，

流动相A为甲醇，流动相B为0.2％甲酸，进行梯度洗脱，梯度程序如下表

流动相的流速为0.8-1.2ml/min，柱温25-40℃，检测波长：244～264nm。

2.根据权利要求1所述的测定方法，其中，步骤(1)中所述对照品溶液中桂皮醛的浓度0.1mg/ml。

3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，步骤(2)中所述药物组合物经粉碎、过筛后加入甲醇，使得每100ml提取溶剂中所含药粉为1g～5g。

4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，所述步骤(2)中提取方法为加热回流提取。

5.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C₁₈柱。

6.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，柱温优选30℃。

7.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，流动相的流速优选1ml/min。

8.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于，检测波长优选为254nm。

9.一种健脾温中、散寒止泻的药物组合物高效液相指纹图谱的建立方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备

称取桂皮醛对照品，加入浓度为100％的甲醇制得对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备

取所述药物组合物，粉碎，过筛，加入浓度为75％的甲醇溶液，使得每100ml提取溶剂中所含药粉为1g～5g，加热回流提取1-2小时，放至室温，加入浓度为75％的甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，即得供试品溶液；

(3)获得色谱图

以所述对照品溶液作为参照物，将所述供试品溶液和所述对照品溶液注入高效液相色谱仪，得到色谱图，

其中，所述高效液相色谱仪的色谱条件如下：

色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，

流动相A为甲醇，流动相B为0.2％甲酸，进行梯度洗脱，梯度程序如下表

流动相的流速为0.8-1.2ml/min，柱温25-40℃，检测波长：244～264nm；

(4)生成对照指纹图谱：

选择合格的多批所述药物组合物色谱图，以桂皮醛为参比峰，得到12个共有峰的图谱，按中位数法计算生成标准对照指纹图谱，其中，指纹图谱相对保留时间为：

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C₁₈柱。

11.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，对照品溶液中桂皮醛的浓度0.1mg/ml。

12.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，检测波长为254nm。