[发明专利]一种发酵豆粕的制备方法

权利要求书

1.一种发酵豆粕的制备方法，其特征在于：该制备方法包括如下步骤：

（1）将斜面保藏的产蛋白酶的耐高温兼性厌氧菌甲基营养型芽孢杆菌（Bacillusmethylotrophicus）接入到灭菌后冷却的LB液体培养基中，于55℃、150r/min培养12h，制备成BacillusmethylotrophicusHL-4种子液备用；

（2）将麸皮和水按质量比为1：1的比例混合，并混匀制备成麸皮培养基，麸皮培养基于121℃灭菌30min后备用；

（3）将步骤（1）制备的BacillusmethylotrophicusHL-4种子液接入到步骤（2）得到的灭菌后冷却的麸皮培养基中并混匀，然后将接入菌种的麸皮培养基分装在已消毒的发酵浅盘中，装料厚度为4cm，浅盘中发酵培养基表面覆盖灭菌的湿纱布，再将浅盘置于已灭菌的固体发酵房内的搁架上发酵，控制环境温度在55℃，发酵时间为48h，发酵结束后的发酵产物经干燥和粉碎后制备成Bacillusmethylotrophicus菌剂备用；

（4）将豆粕粉碎后过60目筛备用；

（5）往步骤（4）粉碎的豆粕中添加营养物和水，混匀得到含水量为40%～85%范围内的发酵培养基；

（6）往步骤（5）制备到的发酵培养基中添加酶和步骤（3）制备的Bacillusmethylotrophicus菌剂，并混匀；

（7）将步骤（6）得到的加入酶和菌剂的发酵培养基堆积在一起，物料的厚度控制在50cm～150cm，并将建堆的发酵物料用塑料薄膜盖上密封好，静置发酵48h～72h；

（8）成品处理：将发酵结束后获得的产物经干燥、粉碎和包装后，即制得了一种发酵豆粕成品。

2.根据权利要求1所述的一种发酵豆粕的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中所用的产蛋白酶的耐高温兼性厌氧菌BacillusmethylotrophicusHL-4在广东省微生物菌种保藏中心的保藏编号为GDMCCNo：60002。

3.根据权利要求1所述的一种发酵豆粕的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中所用的BacillusmethylotrophicusHL-4种子液的接种量以接入种子液的质量占麸皮培养基总质量百分比计，为0.1%～5%。

4.根据权利要求1所述的一种发酵豆粕的制备方法，其特征在于：所述步骤（5）中所用的营养物为玉米粉、氯化钙、氯化锌、氯化亚铁和磷酸氢二钾组成的混合物。

5.根据权利要求1所述的一种发酵豆粕的制备方法，其特征在于：所述步骤（5）中所用的营养物的添加量以加入营养物的质量占发酵培养基总质量的百分比计，分别为：玉米粉0.01%～5%，氯化钙0.01%～5%，氯化锌0.01%～5%，氯化亚铁0.01%～5%，磷酸氢二钾0.01%～5%。

6.根据权利要求1所述的一种发酵豆粕的制备方法，其特征在于：所述步骤（6）中所用的酶为纤维素酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶、β-甘露聚糖酶和蛋白酶。

7.根据权利要求1所述的一种发酵豆粕的制备方法，其特征在于：所述步骤（6）中酶的加入量以添加的酶的质量占发酵培养基总质量百分比计，分别为：纤维素酶0.01%～2%，木聚糖酶0.01%～2%，β-葡聚糖酶0.01%～2%，β-甘露聚糖酶0.01%～2%，蛋白酶0.01%～2%。

8.根据权利要求1所述的一种发酵豆粕的制备方法，其特征在于：所述步骤（6）中Bacillusmethylotrophicus菌剂的加入量以添加的菌剂的质量占发酵培养基总质量百分比计，为0.1%～8%。