[发明专利]一种发酵豆粕的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种发酵豆粕的制备方法，属于发酵工程的技术领域。

背景技术

发酵豆粕是以优质豆粕为主要原料，在微生物菌种发酵下，利用微生物产生的蛋白酶，不但可以将豆粕中的抗原蛋白降解，而且还通过富含小肽而提高制备饲料蛋白的消化和吸收性能。近年来，发酵豆粕作为一种鱼粉替代蛋白在我国饲料工业得到了广泛的应用。

目前，发酵豆粕主要采用多菌种混合发酵技术来制备。专利ZL200310111688“一种发酵法去除豆粕中抗营养因子的方法”公开了一种采用芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌的多菌种混合发酵的发酵豆粕技术。《产蛋白酶兼性厌氧菌株的筛选、酶学性质及发酵豆粕应用探究》（食品科学，2014年第9期）公开了一种采用兼性厌氧菌的发酵豆粕技术。

现有的用于豆粕发酵的主要菌种为常温的枯草芽孢杆菌。该菌是一种好氧菌，在饲料蛋白这种大规模的固态深层发酵中，供养严重不足，需要不断间隔通气；并且发酵是一种放热反应，发酵过程中的物料温度不断升高，会抑制发酵的继续进行，因而也要需要不断翻动降温。虽然，现有技术中有采用兼性厌氧菌的发酵豆粕技术，但是发酵是一种放热反应，发酵过程中的物料温度不断升高，会抑制发酵的继续进行，因而还是需要不断翻动降温。总之，现有的发酵豆粕制备技术中都需在发酵过程不断翻动，这既增加了能耗，又增加了劳动力成本。

发明内容

针对现有豆粕发酵技术所存在的问题，本发明提供了一种发酵豆粕的制备方法。本发明的主要目的提供一种不用翻动的制备发酵豆粕的方法。

为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：一种发酵豆粕的制备方法，包括如下步骤：

（1）将斜面保藏的产蛋白酶的耐高温兼性厌氧菌甲基营养型芽孢杆菌（Bacillusmethylotrophicus）接入到灭菌后冷却的LB液体培养基中，于55℃、150r/min培养12h，制备成BacillusmethylotrophicusHL-4种子液备用；

（2）将麸皮和水按质量比为1：1的比例混合，并混匀制备成麸皮培养基，麸皮培养基于121℃灭菌30min后备用；

（3）将步骤（1）制备的BacillusmethylotrophicusHL-4种子液接入到步骤（2）得到的灭菌后冷却的麸皮培养基中并混匀，然后将接入菌种的麸皮培养基分装在已消毒的发酵浅盘中，装料厚度为4cm，浅盘中发酵培养基表面覆盖灭菌的湿纱布，再将浅盘置于已灭菌的固体发酵房内的搁架上发酵，控制环境温度在55℃，发酵时间为48h，发酵结束后的发酵产物经干燥和粉碎后制备成Bacillusmethylotrophicus菌剂备用；

（4）将豆粕粉碎后过60目筛备用；

（5）往步骤（4）粉碎的豆粕中添加营养物和水，混匀得到含水量为40%～85%范围内的发酵培养基；

（6）往步骤（5）制备到的发酵培养基中添加酶和步骤（3）制备的Bacillusmethylotrophicus菌剂，并混匀；

（7）将步骤（6）得到的加入酶和菌剂的发酵培养基堆积在一起，物料的厚度控制在50cm～150cm，并将建堆的发酵物料用塑料薄膜盖上密封好，静置发酵48h～72h；

（8）成品处理：将发酵结束后获得的产物经干燥、粉碎和包装后，即制得了一种发酵豆粕成品。

所述步骤（1）中所用的产蛋白酶的耐高温兼性厌氧菌甲基营养型芽孢杆菌（Bacillusmethylotrophicus）HL-4已于2016年1月18日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCCNo：60002，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所。

所述步骤（3）中所用的BacillusmethylotrophicusHL-4种子液的接种量以接入种子液的质量占麸皮培养基总质量百分比计，为0.1%～5%。

所述步骤（5）中所用的营养物为玉米粉、氯化钙、氯化锌、氯化亚铁和磷酸氢二钾组成的混合物。所述步骤（5）中所用的营养物的添加量以加入营养物的质量占发酵培养基总质量的百分比计，分别为：玉米粉0.01%～5%，氯化钙0.01%～5%，氯化锌0.01%～5%，氯化亚铁0.01%～5%，磷酸氢二钾0.01%～5%。