[发明专利]一种液体复合乳酸菌发酵剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种液体复合乳酸菌发酵剂，其特征在于，包括植物乳杆菌、戊糖片球 菌、乳双岐杆菌、嗜酸乳杆菌、德氏乳杆菌中的两种或三种；

所述液体复合乳酸菌发酵剂的制备过程为：

S1、制备发酵培养基：将鱼肉浸提液、氯化钠、糖类按比例混合，制得发 酵培养基；

每100毫升发酵培养基含有鱼肉浸提液20～40克、氯化钠5～10克、糖类1～30 克、水余量；所述鱼肉浸提液为鱼肉组织匀浆离心后所得到的上清液；

S2、乳酸菌的液体培养：取MRS固体培养基平板在25℃活化低温保存的 上述乳酸菌，挑取一个单克隆菌落分别接种于10毫升步骤S1制备的发酵培养 基中，在10～25℃、转速为100～220rpm条件下培养12小时后，全部接种至500 毫升步骤S1制备的发酵培养基中，调节所述发酵培养基pH至6.5，继续培养至 所述发酵培养基实际pH降至3.0～5.0，得到上述乳酸菌液体；

S3、液体复合乳酸菌发酵剂的制备：取步骤S2制得的乳酸菌液体，分别稀 释或浓缩至10⁶～10⁸cfu/mL后，等体积混合均匀，即为液体复合乳酸菌发酵剂。

2.一种权利要求1所述液体复合乳酸菌发酵剂的制备过程，其特征在于， 包括如下步骤：

S1、制备发酵培养基：将鱼肉浸提液、氯化钠、糖类按比例混合，制得发 酵培养基；

所述混合比例为：每100毫升发酵培养基含有鱼肉浸提液20～40克、氯化 钠5～10克、糖类1～30克、水余量；所述鱼肉浸提液为鱼肉组织匀浆离心后所 得到的上清液；

S2、乳酸菌的液体培养：取MRS固体培养基平板在25℃活化低温保存的 上述乳酸菌，挑取一个单克隆菌落接种于10毫升步骤S1制备的发酵培养基中， 在10～25℃、转速为100～220rpm条件下培养12小时后，全部接种至500毫升 步骤S1制备的发酵培养基中，调节所述发酵培养基pH至6.5，继续培养至所述 发酵培养基实际pH降至3.0～5.0，得到上述乳酸菌液体；

所述乳酸菌为植物乳杆菌、戊糖片球菌、乳双岐杆菌、嗜酸乳杆菌或德氏 乳杆菌；

S3、液体复合乳酸菌发酵剂的制备：取步骤S2制得的五种乳酸菌液体中的 2～3种，分别稀释或浓缩至10⁶～10⁸cfu/mL后，等体积混合均匀，即为液体复合 乳酸菌发酵剂。

3.根据权利要求2所述液体复合乳酸菌发酵剂的制备过程，其特征在于， 所述糖类为单糖或者双糖。

4.根据权利要求2所述液体复合乳酸菌发酵剂的制备过程，其特征在于， 所述糖类为蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、乳糖、半乳糖、果糖或木糖。

5.根据权利要求2所述液体复合乳酸菌发酵剂的制备过程，其特征在于， 步骤S3中采用步骤S1制得的发酵培养基对所述乳酸菌液体进行稀释处理。

6.一种权利要求1所述液体复合乳酸菌发酵剂的应用，其特征在于，在待 发酵鱼体进行发酵前，涂抹所述液体复合乳酸菌发酵剂，再进行常规条件发酵， 得到低生物胺积累的发酵鱼。

7.根据权利要求6所述液体复合乳酸菌发酵剂的应用，其特征在于，具体 步骤为：

T1、鱼类预处理：取鱼类去内脏、洗净、沥干，备用；

T2、发酵鱼类：将所述液体复合乳酸菌发酵剂均匀涂抹在经过步骤1预处 理的鱼体上，常规条件发酵，得到低生物胺积累的发酵鱼；

所述液体复合乳酸菌发酵剂与所述鱼体的质量比为1～30:100。