[发明专利]使灰飞虱获得水稻条纹病毒的方法及其人工饲料有效
申请号: | 201610131539.X | 申请日: | 2016-03-09 |
公开(公告)号: | CN105746439B | 公开(公告)日: | 2018-07-06 |
发明(设计)人: | 陈丽莹;霍岩;张莉莉 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
主分类号: | A01K67/033 | 分类号: | A01K67/033;A23K10/30;A23K20/163;A23K10/18;A23K50/90;C12N7/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;张立娜 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 灰飞虱 水稻条纹病毒 人工饲料 毒率 饲喂 体内 蔗糖水溶液 实验平台 水稻植株 传统的 抗病 昆虫 无毒 病毒 传播 研究 | ||
1.一种使灰飞虱获得水稻条纹病毒的方法,包括如下步骤:给灰飞虱饲喂含有水稻条纹病毒的人工饲料,从而使所述灰飞虱获得水稻条纹病毒;
所述人工饲料的组成如下:每μL所述人工饲料中含有大于等于300ng所述水稻条纹病毒;余量是浓度为50g/L的蔗糖水溶液。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述人工饲料是按照包括如下步骤的方法制备获得的:以携带有水稻条纹病毒的水稻叶片为材料,提取水稻条纹病毒;将所提取的水稻条纹病毒加入到浓度为50g/L的蔗糖水溶液中,使所述水稻条纹病毒的终浓度大于等于300ng/μL,即得所述人工饲料。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述“以携带有水稻条纹病毒的水稻叶片为材料,提取水稻条纹病毒”的方法包括如下步骤:
(a1)将所述携带有水稻条纹病毒的水稻叶片用液氮研磨成细粉状,加入PBS,4℃震荡15min;
(a2)4℃,14000-16000g离心10min,取上清液;
(a3)过滤除菌:将所述上清液用孔径为0.22μm的滤膜过滤,取滤液;
(a4)将所述滤液进行透析浓缩,从而获得所述水稻条纹病毒。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:在所述方法中,是通过薄膜饲喂法向所述灰飞虱饲喂所述人工饲料的。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述薄膜饲喂法包括如下步骤:将灰飞虱放在两端开口的玻璃管内,将所述玻璃管的一端用双层透气封口膜封口,另一端先用一层透气封口膜封口,无菌面朝外,膜上加所述人工饲料,再将另一层透气封口膜的无菌面朝里封饲料,将所述玻璃管水平放置使所述双层透气封口膜内的所述人工饲料形成的液面垂直,置于25℃、光照周期16h/8h的环境中,所述玻璃管内的所述灰飞虱通过刺穿封口膜吸食所述人工饲料,每天更换一次所述人工饲料,共饲喂2天。
6.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:所述方法中,在给所述灰飞虱饲喂所述人工饲料后,还包括将所述灰飞虱转移到不携带水稻条纹病毒的水稻苗中饲养10天的步骤。
7.用于使灰飞虱获得水稻条纹病毒的人工饲料,其组成如下:每μL所述人工饲料中含有大于等于300ng所述水稻条纹病毒;余量是浓度为50g/L的蔗糖水溶液。
8.制备权利要求7所述人工饲料的方法,为权利要求2或3所述的制备所述人工饲料的方法。
9.权利要求7所述的人工饲料或权利要求8所述的方法在使灰飞虱获得水稻条纹病毒中的应用。
10.权利要求1-6和8中任一所述的方法或权利要求7所述的人工饲料在获得携带水稻条纹病毒的灰飞虱中的应用。
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