[发明专利]一种巯基化壳聚糖表面修饰纳米脂质载体及其制备方法

说明书

技术领域：

本发明属于药物制剂领域，涉及一种生物粘附性巯基化壳聚糖的合 成以及巯基壳聚糖表面修饰纳米脂质载体的制备方法，该药物传递系统 可以用于眼部、胃肠道、经皮、鼻粘膜、静脉注射等多种给药途径。

背景技术：

纳米脂质载体(Nanostructuredlipidcarriers，NLC)是在固体 脂质纳米粒基础上发展而来的新一代纳米载药体系，由固态/液态混合脂 质、表面活性剂及药物组成。固态脂质中性质差异很大的液态油的加入， 可扰乱NLC骨架脂质的晶型排列，使骨架脂质中形成许多晶格缺陷空间， 以便容纳更多的药物分子。

NLC作为纳米药物载体，可以改变膜转运机制，增强药物对生物膜的 渗透性，有利于药物经皮或粘膜渗透吸收以及细胞内的药效发挥。NLC 生物相容性好，可控制药物释放，避免药物降解或泄漏，具有良好的靶 向性，可用于多种给药途径。但是近年来的研究表明，针对给药途径和 给药目的，对NLC进行表面修饰，可以进一步改善NLC药物传递效果。

巯基化壳聚糖(Thiolatedchitosan，TCS)是将壳聚糖(CS)上的 氨基与含巯基化合物反应而制得的具有游离巯基并且水溶性更好的聚合 物。巯基基团的引入赋予CS更为优良的生物特性：①粘膜粘附性显著提 高：TCS的游离巯基能与粘液层糖蛋白上的半胱氨酸形成二硫键，这种共 价键相互作用强度远远高于非共价键。据报道，与未修饰的CS相比，巯 基乙酸壳聚糖的粘附性提高了5-10倍，而巯基丁脒壳聚糖的粘附性则可 提高140倍。②促渗透作用：TCS能够抑制酪氨酸磷酸酶活性，引起紧密 连接相关蛋白的结构重组，调节单层上皮细胞间的流量，进而增加药物 的细胞旁路吸收率。不仅如此，由于此过程主要依赖于易被氧化的谷胱 甘肽，而TCS具有还原性，可以有效保护谷胱甘肽，进而增强药物的渗 透性。③P-gp抑制作用：TCS能够与位于P-gp两个ATP结合结构域的 WalkerA共有序列上的半胱氨酸残基形成共价键，虽然半胱氨酸残基本 身结构的改变并不影响P-gp作用的发挥，但是与TCS共价结合后产生的 空间位阻会降低P-gp的催化活性，从而抑制其作用的发挥。④CYP450 抑制作用：TCS对CYP3A代谢酶家族中的CYP3A4和CYP2A6均存在不同程 度的抑制作用。⑤生物相容性进一步提高：与CS相比，TCS对红细胞的 破坏作用明显减弱，几乎没有细胞毒性，在人体内可以完全降解。

巯基壳聚糖的合成方法通常是在壳聚糖的游离氨基上连接含巯基的 基团实现的。研究表明，TCS上的游离巯基是保证其特性发挥的关键因素， 巯基含量越高，TCS的生物效能越优良。

因此，本发明首先开发了一种改良的TCS合成方法，以获得具有高 含量游离巯基的TCS共聚物，确保其生物效能的发挥；继而通过静电吸 附原理，利用表面荷正电的TCS对表面荷负电的NLC进行表面修饰，赋 予NLC更为优良的生物粘附性和渗透性，从而进一步改善NLC药物传递 系统的粘膜粘附性、生物利用度以及药效。

发明内容：

本发明所要解决的技术问题是构建一种新型TCS表面修饰纳米脂质 载体，赋予其更为优良的生物粘附性、粘膜渗透性和生物相容性等，以 进一步提高药物的生物利用度和功效。

本发明是通过如下技术方案实现的：

本发明所述的巯基化壳聚糖表面修饰纳米脂质载体包含药理活性物 质、脂质材料、乳化剂、巯基化壳聚糖、水，在100mL纳米脂质载体中， 各成分的质量体积百分浓度(w/v)为：药理活性物质0.001％～15％，脂质材 料0.1％～30％，乳化剂0.01％～30％，巯基化壳聚糖0.01％～15％，水余量。

在100mL纳米脂质载体中，各成分的质量百分浓度(w/v)的优选范 围为：药理活性物质0.01％～3％，脂质材料0.1％～8％，乳化剂0.01％～5％， 巯基化壳聚糖0.01％～3％，水余量。

所述的水为蒸馏水。

所述的药理活性物质包括姜黄素、氟比洛芬、环孢素、5-氟尿嘧啶、 两性霉素B、银杏内酯、水飞蓟素、布洛芬、醋酸地塞米松、卡维地洛、 长春西汀、伊曲康唑、尼莫地平、尼群地平、索拉菲尼、羟基喜树碱、 紫杉醇、阿霉素、依托泊甙、多西他赛、冬凌草甲素、醋酸曲安奈德、 吲哚美辛、辅酶Q₁₀等，但并不局限于这些药物。