[发明专利]一种磁性固定化磷脂酶C和磁性固定化磷脂酶A2联合应用对大豆毛油进行脱胶的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种磁性固定化磷脂酶C和磁性固定化磷脂酶A₂联合应用对大豆毛油进行脱胶的方法。

背景技术

植物油精炼一般包括脱胶、脱酸、脱色、脱蜡和脱臭等工序。脱胶是毛油精炼的第一工序,用于从毛油除去磷脂和粘液物质。毛油中的磷脂分为水化磷脂和非水化磷脂，水化磷脂具有亲水性，非水化磷脂含量较高的毛油适合生物酶法脱胶。酶法有反应专一,反应条件温和和较少的环境污染等优点,使其更具有竞争力。与传统的水化脱胶工艺相比,酶法脱胶可大大节约化学物质的消耗量，几乎不产生废水，在环保、经济、质量等方面具有潜在的优势。游离的磷脂酶对环境要求高，效率低，反应后油脂中游离脂肪酸含量升高，酶解效率不高。磁性固定化酶的使用解决了这一问题，酶经磁性固定后便于在反应结束后进行分离，并可以提高其使用的次数。

磷脂酶C(PLC)水解磷脂Sn-3位上磷酸酯键，主要酶解大豆毛油中的卵磷脂(PC)及脑磷脂(PE)，生成甘油二酯(DAG)及磷酸类产物，将磷脂转化成DAG，甘油二酯溶于油中成为食用油的一部分，不需要脱胶过程，从而提高了毛油脱胶的精炼率。磷脂酶A₂(PLA₂)是一种能够特异性酶解磷脂中Sn-2位上酰基的酶，且酶解后不发生酰基转移，产生的游离脂肪酸较少，避免了酸价的升高。因此，采用PLC和PLA₂脱胶，可提高脱胶油的得率。

发明内容

本发明公开了一种磁性固定化PLC和磁性固定化PLA₂连用对大豆毛油进行脱胶的方法，利用PLC水解磷脂Sn-3位上磷酸酯键，酶解大豆毛油中的PC及PE，生成DAG及磷酸类产物，提高油脂得率，先采用PLC进行酶法脱胶操作，而后利用PLA₂特异性酶解磷脂中Sn-2位上酰基的酶，且酶解后不发生酰基转移，产生的游离脂肪酸较少的特点脱除非水化磷脂。用磁性固定化PLC和磁性固定化PLA₂来进行脱胶的方法通过以下步骤实现：一、PLC和PLA₂的磁性固定化；二、磁性固定化PLC和磁性固定化PLA₂连用脱胶；三、测定脱胶油中的磷含量。

具体实施方式

具体实施方式一：一种磁性固定化PLC和磁性固定化PLA₂联合应用对大豆毛油进行脱胶的方法，通过以下步骤实现：

步骤一：PLC和PLA₂的磁性固定化：首先将lg的Fe₃O₄/SiOx-g-P(GMA)复合粒子置于在50mL的磷酸缓冲液(0.1M，pH7.0)中浸泡24h，磁分离后将上述浸泡后的载体加入到一定量的含0.2％的磷脂酶的磷酸缓冲液(0.1M，pH6.5)中，同时在45℃下搅拌反应一段时间，最后磁分离并用磷酸缓冲液(0.1M，pH7.0)洗涤得到固定化PLC。将所得的固定化酶放置在冰箱内4℃下保存。将lg的Fe₃O₄/SiOx-g-P(GMA)纳米复合粒子置于在50mL的磷酸缓冲液(0.1M，pH7.0)中浸泡24h，磁分离后将上述浸泡后的载体加入到一定量的含0.2％的磷脂酶的磷酸缓冲液(0.1M，pH7.0)中，同时在45℃下搅拌反应一段时间，最后磁分离并用磷酸缓冲液(0.1M，pH7.0)洗涤得到固定化PLA₂。将所得的固定化酶放置在冰箱内4℃下保存。