[发明专利]鉴别基因I型与II型鸭呼肠孤病毒的引物及方法

权利要求书

1.一种用于鉴别基因I型与II型鸭呼肠孤病毒的引物，包括引物对1和引物对2，其特征在于，

引物对1为：

上游引物：5’-CTGACGCTTTTGAAGTCCACT-3’，

下游引物：5’-AACACTGTATCCTGGACCAGC-3’，

引物对2为：

上游引物：5’-CGTCTATTCTCGTTTCCCTTC-3’，

下游引物：5’-GAGAGAGAGGATAGCTCGGAC-3’。

2.一种包含如权利要求1所述引物的试剂盒。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，还包括阳性对照。

4.如权利要求2所述试剂盒在鉴别基因I型与II型鸭呼肠孤病毒中的应用。

5.一种鉴别基因I型与II型鸭呼肠孤病毒的方法，其特征在于，步骤如下：

(1)提取样本基因组RNA；

(2)以提取的样本基因组RNA为模板，以权利要求1所述引物进行RT-PCR扩增；

(3)RT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，

若扩增产物大小为249bp，则样本为基因I型鸭呼肠孤病毒，若扩增产物大小为505bp，则样本为基因II型鸭呼肠孤病毒，

所述RT-PCR扩增为一步法RT-PCR扩增，

所述RT-PCR扩增反应体系为：

所述RT-PCR扩增反应方法为：50℃逆转录30min；94℃预变性2min；94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸30s，共35个循环。