[发明专利]一种表面预成骨种植体及其制备方法

权利要求书

1.一种表面预成骨种植体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）取新鲜离体骨肉瘤组织，用胶原酶将组织块消化为单个骨肉瘤细胞后，离心取细胞沉淀；

2）用培养基重悬细胞沉淀，获得骨肉瘤细胞悬液；

3）培养骨肉瘤细胞悬液，用胰蛋白酶消化后传代培养；

4）将获得的骨肉瘤细胞培养在含有促细胞外基质分泌因子的培养基中，使骨肉瘤细胞复层生长形成骨肉瘤细胞膜片；

5）将骨肉瘤细胞膜片修整后包裹种植体，形成种植体细胞膜片复合体；

6）将种植体细胞膜片复合体放入成骨诱导培养液中在孵箱内进行成骨诱导，并定期换液；

7）待有足够的骨质生成后，从培养液中取出种植体细胞膜片复合体，去除包裹种植体的骨肉瘤细胞膜片，去净残余的骨肉瘤细胞；

8）对获得的表面预成骨种植体进行彻底的清理、消毒、灭菌。

2.根据权利要求1所述的一种表面预成骨种植体的制备方法，其特征在于，步骤1）是用I型胶原酶消化。

3.根据权利要求1所述的一种表面预成骨种植体的制备方法，其特征在于，步骤3）中是将骨肉瘤细胞悬液在37℃、5%CO2浓度及饱和湿度条件下进行培养。

4.根据权利要求1所述的一种表面预成骨种植体的制备方法，其特征在于，步骤6）是将种植体细胞膜片复合体放入到含有地塞米松、抗坏血酸、β-磷酸甘油的培养液中进行成骨诱导。

5.根据权利要求1所述的一种表面预成骨种植体的制备方法，其特征在于，步骤8）是使用Co60射线辐照种植体灭菌。

6.采用权利要求1~5中所述的方法制得的表面预成骨种植体。