[发明专利]一种透明质酸生物粘合剂的制备方法

说明书

本发明涉及一种生物粘合剂的制备方法，特别是一种透明质酸生物粘合剂的制备方法，属于生物材料制备技术领域。本发明是通过在冷冻干燥法制得的无定型透明质酸分子链上接枝烯基基团，经溶解、混合制备得到的生物粘合剂。本发明采用混合溶剂环境下的冷冻干燥工艺，大大破坏透明质酸的晶型结构，形成无定型结构的透明质酸分子，使得透明质酸的接枝率大大提高，完全克服因接枝率低下引起的紫外固化速度缓慢、形成的凝胶强度差的问题。本发明方法制得的生物粘合剂在紫外光的照射下迅速凝胶，且凝胶安全、生物相容性好、可完全降解吸收。本发明制备方法简单、成本低，易工业化生产。

技术领域

本发明涉及一种生物粘合剂的制备方法，特别是一种透明质酸生物粘合剂的制备方法，属于生物材料的制备技术领域。

背景技术

生物粘合剂是一种用于防止组织粘连、止血、手术中防止空气和体液泄漏的生物医学材料，其使用可替代传统复杂耗时的外科手术缝合，起到快速封闭创面、避免创面感染、有效减轻瘢痕的效果。

目前，临床上使用较多的是氰基丙烯酸酯类粘合剂、纤维蛋白类粘合剂等。中国专利公开号为CN104958781A，公开日为2015年10月7日，发明名称为“一种化学医用粘合剂组合物及其制备方法”公开了氰基丙烯酸酯粘合剂的制备方法；中国专利公开号为CN101352581A，公开日为2009年1月28日，发明名称为“关节软骨修复移植物固定用粘合剂及人纤维蛋白原在制备该粘合剂中的应用”等公开了纤维蛋白类粘合剂的制造方法。然而，这些粘合剂仍然存在各种不足之处。氰基丙烯酸酯类粘合剂虽然能在常温下迅速固化，但是在其使用过程中因聚合反应产生的热量会对机体组织造成一定程度的灼伤、组织相容性差造成创面愈合效果差等问题；纤维蛋白类粘合剂虽然具有良好的生物相容性和可降解性，但是因其来源为异体的人或动物血清而可能存在潜在的病毒感染风险，其临床使用的安全性受到广泛关注。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的在于提供一种安全、生物相容好、可降解吸收的生物粘合剂的制备方法。

为了实现上述目的，其技术方案如下，一种透明质酸生物粘合剂的制备方法，所述制备方法按以下步骤进行：

a. 糊状无定型透明质酸的制备

将透明质酸和非质子溶剂置于去离子水中，透明质酸与去离子水质量体积比为1：10～200，非质子溶剂与去离子水体积比为1：10～50，室温下搅拌1～24小时，将透明质酸、非质子溶剂、去离子水形成的溶液在温度为-10～-50℃、压强为50～200Pa条件下，干燥24～72小时，得到糊状无定型透明质酸；

b. 马来酰化透明质酸的制备

将由步骤a得到的糊状无定型透明质酸和马来酸酐置于非质子溶剂中，糊状无定型透明质酸与非质子溶剂质量体积比为1：5～200，糊状无定型透明质酸分子链上羟基与马来酸酐的酸酐基摩尔比为1：0.1～20，室温下搅拌均匀，在25～80℃条件下反应，反应时间为12～48小时，反应结束后，在糊状无定型透明质酸、马来酸酐、非质子溶剂的混合溶液中加入1mol/L的NaHCO₃溶液，调整混合溶液的pH至7-8，将混合溶液进行透析，透析时间为2天，形成马来酰化透明质酸溶液，将马来酰化透明质酸溶液在温度为-50℃、压强为1～20Pa条件下，冷冻干燥24～72小时，得到摩尔取代度为0.3～0.8的马来酰化透明质酸；

c. 透明质酸生物粘合剂的制备

将由步骤 b得到的马来酰化透明质酸与紫外光引发剂、磷酸盐缓冲溶液按照质量百分比分别为：

马来酰化透明质酸 1～8%

光引发剂 0.05～0.1%

磷酸盐缓冲溶液 91.9～98.95%