[发明专利]一种甲基营养型芽孢杆菌可湿性粉剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种以甲基营养型芽孢杆菌为活性成分的可湿性粉剂，其特征在于：所述可湿性粉剂是将甲基营养型芽孢杆菌JQ-018经种子活化、种子培养、发酵培养、干燥成甲基营养型芽孢杆菌JQ-018粉末并添加白炭黑、硅藻土、可溶性淀粉、助剂成分后制成；所述甲基营养型芽孢杆菌JQ-018，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间：2015年12月7日，保藏登记号为CGMCC No.11838。

2.如权利要求1所述的以甲基营养型芽孢杆菌为活性成分的可湿性粉剂，其特征在于：所述甲基营养型芽孢杆菌JQ-018粉末以及各添加成分的重量百分比为甲基营养型芽孢杆菌JQ-018粉末20-40％、硅藻土10-20％、助剂15-20％、可溶性淀粉20-30％、白炭黑10-15％。

3.如权利要求2所述的以甲基营养型芽孢杆菌为活性成分的可湿性粉剂，其特征在于：所述助剂包括分散剂D—1002、润湿剂W—2001、亚甲基双萘磺酸和十二烷基硫酸钠，且其质量比为3:1:5:4。

4.一种权利要求1所述的以甲基营养型芽孢杆菌为活性成分的可湿性粉剂的制备方法，具体包括：

(1)菌种活化：将低温保存的甲基营养型芽孢杆菌JQ-018菌株接种于LB固体培养基上，于35-38℃培养36h；挑取单菌落转接到LB斜面培养基上，于35-38℃培养16-24h，用无菌水洗下培养基表面菌体作为接种液；

(2)一级种子液制备：按照5-10％的接种量向种子培养基中接入步骤(1)制备的接种液，转速200-260rpm，温度35-38℃，摇床培养16-24h，作为一级种子液；

(3)二级种子液制备：按照0.5-3％的接种量向种子培养基中接入步骤(2)制备的一级种子液，通气量为0.4-1.5V/V〃min，搅拌速度为180-260rpm，培养时间为18-24h；作为二级种子液；

(4)发酵培养：按照5-10％的接种量向发酵培养基中接入步骤(3)制备的二级种子液，通气量为0.4-1.5V/V〃min，搅拌速度为180-260rpm，培养时间为24-30h，得到JQ-018菌株发酵液；

(5)将发酵液进行压滤，收集滤饼进行沸腾干燥，得到固体的JQ-018，将重量百分比的20-40％的固体JQ-018菌、10-20％的硅藻土、15-20％的助剂、20-30％的可溶性淀粉、10-15％的白炭黑混合均匀混合；然后利用气流粉碎机粉碎；得到甲基营养型芽孢杆菌JQ-018可湿性粉剂。

5.如权利要求4所述的以甲基营养型芽孢杆菌为活性成分的可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)和步骤(3)中种子培养基的组成成分及其重量百分比为：葡萄糖1-2％，蛋白胨1-1.5％，酵母粉0.6-1％，牛肉膏0.5-0.7％，氯化钠0.5％，其余为水。

6.如权利要求4所述的以甲基营养型芽孢杆菌为活性成分的可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中发酵培养基的组成成分及其重量百分比为：葡萄糖3-5％，蛋白胨0.5-1.5％，酵母粉0.03-0.08％，蛋白胨0.1-0.3％，豆粕粉0.5-1.5％，硫酸镁0.01-0.05％，硫酸锰0.01-0.05％，其余为水。

7.如权利要求4所述的以甲基营养型芽孢杆菌为活性成分的可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中的沸腾干燥温度为80℃。

8.如权利要求4所述的以甲基营养型芽孢杆菌为活性成分的可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中可湿性粉剂的细度在400目以上。

9.如权利要求4所述的以甲基营养型芽孢杆菌为活性成分的可湿性粉剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中气流粉碎机是在30～50℃温度范围内将混合物粉碎。

10.如权利要求1所述的以甲基营养型芽孢杆菌为活性成分的可湿性粉剂的应用，其特征在于：所述可湿性粉剂在制备防治马铃薯疮痂病药物中的应用。