[发明专利]一种甲基营养型芽孢杆菌可湿性粉剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及农业和生物技术领域，尤其涉及一种甲基营养型芽孢杆菌可湿性粉剂及其制备方法和应用。

背景技术

微生物农药，是指应用活体微生物及其代谢产物对农业病虫害进行防治。微生物农药具有选择性强，对人、畜、农作物和自然环境安全，不易产生抗药性等特点，因此得到了广泛研究。目前市场上已经有较为成熟的微生物农药产品，例如苏云金芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等。

马铃薯是我国重要的农作物之一，地位仅次于水稻、小麦和玉米，为我国第四大农作物。马铃薯的种植区域广泛，病害也较为复杂，其中由多种植物病原链霉菌引起的马铃薯疮痂病是当今影响马铃薯生产的重要病害之一。马铃薯疮痂病的发生原因

①种薯带菌。在种薯生产中微型薯的疮痂病尤为严重，带病种薯的运转是病害传播的重要途径之一。

②土壤偏碱。东北地区栽培马铃薯常常施用草木灰等碱性肥料，多年累积后土壤逐渐偏碱，造成马铃薯疮痂病逐年加重。

在西北、华北的一些地区，气候多比较干旱，加之农民使用一些碱性肥料，病害往往会偏重。

③病原菌在土壤中积累。华南一些地区，由于多年的连作也会造成病菌大量积累。

④重视程度不够。疮痂病对马铃薯的产量和肉质影响并不大，虽然该病已经成为马铃薯生产的一大障碍，并且会严重影响马铃薯的贮藏，但还未引起人们的足够重视，很多地区对该病还都不甚了解，也成为了马铃薯疮痂病逐年加重的原因。

马铃薯疮痂病病菌主要为害块茎，从皮孔侵入，发病初期在块茎表皮产生褐色斑点，以后逐渐扩大，侵染点周围的组织坏死，块茎表面变粗糙，质地木栓化。同时依据病原菌种类的不同，在成熟的薯块上常表现为凸起或凹陷的表面病斑，严重时病斑连片，薯块的品质降低。同时，由于表皮组织被破坏后，易被其他病原菌侵染，造成块茎腐烂。

目前农业上对马铃薯疮痂病的防治主要采用轮作或者使用农药喷洒，不利于马铃薯的生产和食品、生态的安全，利用生物防治土传病害是一种行之有效的防治措施，是植物保护中必不可少的组成部分。特别是利用自然界中原本存在的植物根际有益微生物对靶标病原微生物的拮抗作用，来控制病原微生物的危害，具有较小的环境风险，是一种环境友好的防治技术。

发明内容

本发明所要解决的问题是通过一种甲基营养型芽孢杆菌可湿性粉剂及其制备方法和应用，实现对马铃薯疮痂病的防治，可以达到安全、高效的防治效果。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种以甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)JQ—018为活性成分的可湿性粉剂，是将甲基营养型芽孢杆菌JQ-018经种子活化、种子培养、发酵培养、干燥成甲基营养型芽孢杆菌JQ-018粉末并添加白炭黑、硅藻土、可溶性淀粉、助剂成分后制成；甲基营养型芽孢杆菌JQ-018，简称JQ—018菌株，是从河北省张北县大囫囵村马铃薯根际土壤中分离获得，已于2015年12月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为CGMCC No.11838。

本发明的甲基营养型芽孢杆菌JQ-018从河北省张北县大囫囵村马铃薯根基土壤中分离、纯化以及筛选步骤获得的，采用形态特征、生理生化实验、分子生物学鉴定法以及16SrDNA同源序列比对分析最终确定上述保藏编号的菌株为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。

优选的，甲基营养型芽孢杆菌JQ-018粉末以及各添加成分的重量百分比为甲基营养型芽孢杆菌JQ-018粉末20-40％、硅藻土10-20％、助剂15-20％、可溶性淀粉20-30％、白炭黑10-15％。

优选的，可湿性粉剂的助剂组成成分为：分散剂D—1002(改性烷基萘磺酸盐，北京汉莫克化学技术有限公司)、润湿剂W—2001(改性烷基硫酸盐，北京汉莫克化学技术有限公司)、亚甲基双萘磺酸和十二烷基硫酸钠，且其质量比为3:1:5:4。

甲基营养型芽孢杆菌为活性成分的可湿性粉剂的制备方法，具体步骤如下：

(1)菌种活化：将低温保存的甲基营养型芽孢杆菌JQ-018菌株接种于LB固体培养基上，于35-38℃培养36h；挑取单菌落转接到LB斜面培养基上，于35-38℃培养16-24h，用无菌水洗下培养基表面菌体作为接种液。