[发明专利]一种细胞特异性分选体系和细胞特异性分选方法有效
申请号: | 201610143513.7 | 申请日: | 2016-03-14 |
公开(公告)号: | CN105695326A | 公开(公告)日: | 2016-06-22 |
发明(设计)人: | 任辉;孙大鹏 | 申请(专利权)人: | 海狸纳米科技(苏州)有限公司 |
主分类号: | C12M1/42 | 分类号: | C12M1/42;C12M1/40;G01N33/53;C12N5/0783 |
代理公司: | 苏州华博知识产权代理有限公司 32232 | 代理人: | 何蔚 |
地址: | 215000 江苏省苏州市苏州工*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 特异性 分选 体系 方法 | ||
1.一种细胞特异性分选体系,其特征在于:所述细胞特异性分选 体系包括磁珠、核酸酶、核酸链、特异性抗体;所述磁珠表面修饰NHS 基团或环氧基团;所述核酸酶通过NHS基团或环氧基团与磁珠连接, 形成磁珠-核酸酶复合物;所述核酸链通过NHS基团或环氧基团与磁 珠连接,特异性抗体通过交联剂与核酸链连接,形成磁珠-核酸链- 特异性抗体复合物。
2.如权利要求1所述的细胞特异性分选体系,其特征在于,所述 核酸链一端修饰有氨基,另一端修饰有巯基;或者两端均修饰有氨基 和/或巯基。
3.如权利要求1所述的细胞特异性分选体系,其特征在于,所述 核酸酶为限制性内切酶、脱氧核糖核酸酶I。
4.如权利要求1所述的细胞特异性分选体系,其特征在于,所述 交联剂为Sulfo-SMCC。
5.一种细胞特异性分选方法,其特征在于,所述方法包括以下步 骤:
1)对磁珠表面进行NHS或环氧基团修饰;
2)将核酸酶通过NHS基团或环氧基团链接到磁珠表面,形成磁 珠-核酸酶复合物;
3)将核酸链通过磁珠上的NHS基团或环氧基团连接到磁珠表面, 形成核酸链-磁珠复合物;
4)将核酸链通过交联剂和特异性抗体链接,形成磁珠磁珠-核酸 链-特异性抗体复合物;
5)在细胞样品中加入磁珠-核酸链-特异性抗体复合物,细胞被 磁珠特异性捕获后形成磁珠-核酸链-特异性抗体-细胞复合物;
6)通过外加磁场的作用,磁吸收集目的细胞,去除非目的细胞;
7)在收集的磁珠与目标细胞复合物的样品中加入磁珠-核酸酶复 合物,剪切核酸链,使得目的细胞被释放;
8)通过外加磁场的作用,去除磁珠-核酸酶复合物和核酸链剪切 后的磁珠,得到目的细胞。
6.如权利要求5所述的细胞特异性分选方法,其特征在于,所述 核酸链一端修饰有氨基,另一端修饰有巯基;或者两端均修饰有氨基 或巯基。
7.如权利要求5所述的细胞特异性分选方法,其特征在于,所述 核酸酶为限制性内切酶、脱氧核糖核酸酶I。
8.如权利要求5所述的细胞特异性分选方法,其特征在于,所述 交联剂为Sulfo-SMCC。
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