[发明专利]一种离心分离检测方法在审
申请号: | 201610143694.3 | 申请日: | 2016-03-14 |
公开(公告)号: | CN107192819A | 公开(公告)日: | 2017-09-22 |
发明(设计)人: | 刘凤鸣 | 申请(专利权)人: | 北京康华源科技发展有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人: | 关畅,王春霞 |
地址: | 100085 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 离心 分离 检测 方法 | ||
1.一种离心分离检测方法,包括如下步骤:采用离心装置驱动液相流经固相膜,所述液相包括含有待检物的待检样品和检测相,所述检测相为含有能够与所述待检物直接或间接形成特异性结合的检测指示剂的物质;所述液相流经固相膜时,与所述固相膜上包被的待检物特异性结合物结合形成检测指示剂-待检物-待检物特异性结合物的复合物,所述复合物被捕获固定到所述固相膜上,检测器通过检测被间接固定到所述固相膜上的检测指示剂的量,以检测所述待检物的含量。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述方法采用的装置中,所述离心装置的旋转部件采用平面型或由中心向外倾斜型。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述方法采用的装置中,所述离心装置的旋转部件平面的中部设有:所述待检样品和所述检测相各自的储存装置,所述待检样品和所述检测相的进样装置及驱动装置;
所述离心装置的旋转部件平面的外沿设有所述固相膜的放置装置。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于:所述方法采用的装置中,所述检测器设于所述固相膜的一侧或两侧。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述离心装置的转速和所述进样装置的进样速度均采用程序控制方式;
所述离心装置的转速为200~10000r/min;
经所述离心装置离心的时间为1~5min。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法,其特征在于:所述固相膜为硝酸纤维素膜、聚偏氟乙烯膜、尼龙膜、DEAE纤维素膜,且所述固相膜的一面或两面带有背衬;
所述检测器包括吸光度、荧光、化学发光和图像颜色数字处理的检测器中的任一种。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于:所述待检物为具有免疫活性的蛋白质或与蛋白质偶联产生免疫活性的物质;
所述待检物特异性结合物为与所述待检物特异性结合的抗原或抗体;
所述检测指示剂为胶体金属、染料、荧光素和化学发光物质中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述胶体金属为胶体金、胶体硒和胶体金磁微粒中的至少一种;
所述荧光素为异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明、四甲基异硫氰酸罗丹明、藻红蛋白、多甲藻黄素叶绿素蛋白、碘化丙啶、别藻青蛋白和铕化合物中的至少一种;
所述化学发光物质为鲁米诺和异鲁米诺及其衍生物类、吖啶酯及吖淀酰胺类、(金钢烷)-1,2-二氧乙烷及其衍生物和三联吡啶钌中的至少一种。
9.根据权利要求1-8所述的方法,其特征在于:所述方法中,所述复合物形成有如下任一种:
1)所述待检物特异性结合物包含有同时与所述待检物和所述检测相形成特异性结合的一级中间相;
2)所述待检物特异性结合物包含有同时与所述一级中间相和所述检测相形成特异性结合的二级中间相;
所述一级中间相和所述二级中间相均为具有特异性结合能力的抗原、抗体、亲和素、生物素及其类似物中的至少一种;
所述方法中还包括在所述结合反应之后用清洗相清洗所述固相膜的步骤,所述清洗相为磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液和Tris缓冲液中的至少一种。
10.权利要求1-9中任一项所述的方法在免疫产品的含量检测中的应用。
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