[发明专利]一种离心分离检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种离心分离检测方法，属于免疫检测技术领域。

背景技术

免疫学检测技术是应用免疫学原理设计的测定抗原、抗体、免疫细胞及化学成分等的实验手段，广泛用于来源于人体和动物体可进行疾病诊断和健康检测的样品以及用于环境、药物分析、食品和工业分析的样品。常用的有免疫浊度技术、固相酶免疫测定技术、化学发光检测技术、免疫荧光标记技术、流式细胞术、胶体金技术等。

免疫浊度技术，也称免疫浊度法是可溶性抗原、抗体在液相中特异结合，产生一定大小的复合物，形成光的折射或吸收，测定这种折射或吸收后的透射光或散射光作为计算单位，用于定量检测，但检测灵敏度低，不适合于微量检测。固相酶免疫测定技术基于抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记，结合在固相载体表面的抗原或抗体保持其免疫学活性，抗原或抗体的酶结合物既保留其免疫学活性，又保留酶的活性，在测定时，把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应，具有灵敏度高、线性响应范围宽和易于实现自动化等显著优点，但检测反应时间长限制了其使用。免疫化学发光检测技术是一种高灵敏的微量及痕量分析技术，具有操作方便、灵敏度高、线性响应范围宽和易于实现自动化等显著优点，广泛地应用于环境、临床、药物分析、食品和工业分析中，也是基于抗原或抗体的固相分离手段及抗原或抗体的发光试剂标记技术，但检测反应时间长及对检测设备的要求高也影响其使用。免疫荧光标记技术、流式细胞术、胶体金技术也是常用的检测技术被广泛使用，但均有其相应的不足，检测反应时间长或灵敏度、准确性欠缺是普遍存在的不足。

高灵敏度、快速、小型化、全定量、自动化是目前临床免疫检测技术产品的发展趋势，但现有的都无法同时实现上述功能。

发明内容

本发明的目的是提供一种离心分离检测方法。本发明具有灵敏度高、检测时间短的特点。

本发明提供的离心分离检测方法，包括如下步骤：采用离心装置驱动液相流经固相膜，所述液相包括含有待检物的待检样品和检测相，所述检测相为含有能够与所述待检物直接或间接形成特异性结合的检测指示剂的物质；所述液相流经固相膜时，与 所述固相膜上包被的待检物特异性结合物结合形成检测指示剂-待检物-待检物特异性结合物的复合物，所述复合物被捕获固定到所述固相膜上，检测器通过检测被间接固定到所述固相膜上的检测指示剂的量，即检测到所述待检物的含量。

上述的方法中，所述方法采用的装置中，所述离心装置的旋转部件采用平面型或由中心向外倾斜型。

上述的方法中，所述方法采用的装置中，所述离心装置的旋转部件平面的中部设有：所述待检样品和所述检测相各自的储存装置，所述待检样品和所述检测相的进样装置及驱动装置；

所述离心装置的旋转部件平面的外沿设有所述固相膜的放置装置。

本发明中，所述固相膜的进样近端与液体吸附分散装置连接，进样远端与液体吸附装置连接；

所述液体吸附分散装置采用具有快速的液体分散特性的固相材料，所述固相材料为多聚酯纤维素膜和/或玻璃纤维素膜，具体可为胶体金标记吸附膜、荧光标记抗体吸附膜、化学发光标记吸附膜和/或分散膜；所述液体吸附装置采用吸水性材料，所述吸水性材料为吸水纸和/或吸水凝胶。

上述的方法中，所述方法采用的装置中，所述检测器设于所述固相膜的一侧或两侧。

上述的方法中，所述离心装置的转速和所述进样装置的进样速度均采用程序控制方式；

所述离心装置的转速为200～10000r/min，具体可为500～5000r/min、800～3000r/min或800～2000r/min；

经所述离心装置离心的时间可为1～5min，具体可为1min或1～3min。

上述的方法中，所述固相膜为硝酸纤维素膜、聚偏氟乙烯膜、尼龙膜、DEAE纤维素膜，且所述固相膜的一面或两面带有背衬；

所述检测器包括吸光度、荧光、化学发光和图像颜色数字处理的检测器中的任一种。

本发明中，所述聚偏氟乙烯膜简称PVDF膜；

所述DEAE纤维素膜指的是将二乙氨乙基(DEAE)引入纤维素分子后制成的纸状薄膜，是一种弱碱型阴离子交换材料。

上述的方法中，所述待检物为具有免疫活性的蛋白质或与蛋白质偶联产生免疫活性的物质；

所述待检物特异性结合物为与所述待检物特异性结合的抗原或抗体；

所述检测指示剂为胶体金属、染料、荧光素和化学发光物质中的至少一种。