[发明专利]一种多功能融合多肽及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种多功能融合多肽及其制备方法和应用，属于生物制药领域。本发明的融合多肽含有结构域Pro‑(D‑Pyr)‑(D‑Cys)‑Bip‑Arg‑Gly‑Glu，Ile‑Val‑Arg‑Arg‑Ala‑Asp‑Arg‑Ala‑Ala‑Val‑Pro、Arg‑Gly‑Asp和Gly‑Gly‑Gly‑Gly，可以治疗人肺纤维化、肺部组织病变、肺癌和其它肿瘤，在肺纤维化细胞模型中，本发明的多肽可以显著降低模型组细胞中羟脯氨酸含量，抑制肺纤维化的进程；MTT实验表明本发明的多肽可以抑制多种人源肿瘤细胞的增殖；本发明的多肽是通过人工合成的方法制备，制备方法简单，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物制药领域，更具体地说，涉及一种新的多功能融合多肽及其制备方法和应用。

背景技术

肺纤维化尤其是特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)长期以来被认为是一种进行性发展、基本上不可逆的病理改变，IPF患者诊断后5年病死率达到65％，严重威胁公众健康。由于目前的治疗措施疗效甚微，IPF甚至还没有形成一个公认的治疗方案。肺纤维化最常见的症状是：呼吸困难。轻度肺纤维化时，呼吸困难常在剧烈活动时出现，因此常常被忽视或误诊为其他疾病。当肺纤维化进展时，在静息时也发生呼吸困难，严重的肺纤维化患者可出现进行性呼吸困难。

多种因素可引起肺纤维化，如职业性粉尘、放射性损伤及某些药物(博莱霉素)等，此外还有一类不明病因的肺纤维化(如IPF)。虽然起因不同，但肺纤维化的发展过程基本相似，即由下呼吸道炎症细胞浸润起始，逐步引起肺泡上皮细胞和血管内皮细胞损伤，并伴有肌成纤维细胞(myofibroblast,MF)和Ⅱ型肺泡上皮细胞增殖的细胞因子等的释放，致细胞外基质蛋白和胶原沉积，最终引起肺部结构的损害。多种原因引起的肺损伤在初期存在明显炎症状态，而肺纤维化发生发展的后期炎症状态不明显，这可能是抗炎疗法治疗肺纤维化失效的重要原因。

近期的关于肺纤维化机制的研究发现：蛋白多Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro是人血管新生内皮抑素的一段序列，具有抑制血管新生的作用，三肽Arg-Gly-Asp被发现可以特异性的结合在新生血管表面表达的整合素蛋白，以上两个氨基酸序列的融合多肽(专利公开号：CN1699408A)已被用于抗肿瘤和抗类风湿的治疗。蛋白多肽Pro-(D-Pyr)-(D-Cys)-Bip-Arg-Gly-Glu(专利公开号：CN102746380A)被发现可以抑制细胞外基质金属蛋白酶的活性。目前这两种短肽已被申请用于肿瘤、类风湿疾病的治疗，但是这两种多肽只能针对单一靶点发挥作用，不能够同时针对多个靶点发挥作用，肿瘤细胞对单靶点的药物更容易产生抗药性。

发明内容

1.要解决的问题

针对现有的多肽药物存在靶点单一、易产生抗药性、缺乏治疗肺纤维化的特效药物等问题，本发明提供了一种多功能融合多肽及其制备方法和应用，可以治疗人肺纤维化、肺部组织病变、肺癌和其它肿瘤。本发明的多肽包含多个结构域，同时靶向多个靶点，在肺纤维化细胞模型中，本发明的多肽可以显著降低模型组细胞中羟脯氨酸含量，抑制肺纤维化的进程。

2.技术方案

为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：

一种多功能融合多肽，多肽中含有结构域Pro-(D-Pyr)-(D-Cys)-Bip-Arg-Gly-Glu，Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro、Arg-Gly-Asp和Gly-Gly-Gly-Gly。

优选地，多肽的氨基酸序列为：

多肽I：Pro-(D-Pyr)-(D-Cys)-Bip-Arg-Gly-Glu-Gly-Gly-Gly-Gly-Ile-Val-Arg-Arg-Ala-Asp-Arg-Ala-Ala-Val-Pro-Gly-Gly-Gly-Gly-Arg-Gly-Asp；