[发明专利]一种PCR热启动方法

权利要求书

1.一种PCR热启动方法，其特征在于：在缓冲液中扩增核酸，所述缓冲液包括20-100mM温度敏感的pH缓冲剂；2.5-50mMpH敏感的镁离子络合剂；2-30mM水溶性镁盐；20-100mM单价盐。

2.根据权利要求1所述的PCR热启动方法，其特征在于：所述缓冲液包括50mM温度敏感的pH缓冲剂；5mMpH敏感的镁离子络合剂；4mM水溶性镁盐；50mM单价盐。

3.根据权利要求1所述的PCR热启动方法，其特征在于：所述pH敏感的镁离子络合剂与水溶性镁盐的摩尔比为1-1.5:1。

4.根据权利要求1或2所述的PCR热启动方法，其特征在于：所述温度敏感的pH缓冲剂包括三羟甲基氨基甲烷，N-三(羟甲基)甲基甘氨酸，双(2-羟甲基)氨基-三(羟甲基)甲烷和1,3-双(三羟甲基)甲基氨基丙烷的一种或多种的混合物。

5.根据权利要求1或2所述的PCR热启动方法，其特征在于：所述温度敏感的pH缓冲剂为在温度上升10℃时，其pKa值下降超过0.15。

6.根据权利要求1或2任一项所述的PCR热启动方法，其特征在于：所述pH敏感的镁离子络合剂为EDTA，EGTA和BTPA的一种或多种的混合物。

7.根据权利要求1或2所述的PCR热启动方法，其特征在于：所述水溶性镁盐为氯化镁，硫酸镁和醋酸镁中的一种或多种的混合物。

8.根据权利要求1所述的PCR热启动方法，其特征在于：所述单价盐包括钠盐，钾盐和铵盐中的一种或多种的混合物。