[发明专利]利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物的方法

权利要求书

1.一种利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物的方法，其特征在 于，包括以下步骤：

S1、提供组织源相同的肿瘤细胞和正常配对的正常原代细胞，并分别对其 进行培养；

S2、将所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞分别接种，并将所述肿瘤细胞和 所述正常原代细胞分别分为实验组和对照组；

S3、提供多个针对该肿瘤的备选药物，并将多个所述备选药物分别对所述 肿瘤细胞和所述正常原代细胞的实验组进行加药处理；

S4、通过ATP生物荧光药效检测方法检测并分析各备选药物对所述肿瘤细 胞和所述正常原代细胞的抑制率，初筛得到候选药物；

S5、将候选药物组作用的所述肿瘤细胞组和所述正常原代细胞进行流式凋 亡检测，筛选出所述候选药物中对所述肿瘤细胞的抑制率最高且同时对所述正常 细胞的抑制率最低的药物，作为临床推荐药物。

2.根据权利要求1所述的利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物 的方法，其特征在于，所述步骤S1包括：

S11、提供组织源相同的肿瘤细胞和正常配对的正常原代细胞，并将所述肿 瘤细胞和所述正常原代细胞分别吹散成单个细胞；

S12、将所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞分别加入培养皿内培养；

S13、定期对所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞进行观察并拍照，同时进行 细胞传代，培养预定时间后，收集所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞。

3.根据权利要求2所述的利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物 的方法，其特征在于，在所述步骤S12中，所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞 的培养温度为36.5℃-37.5℃，二氧化碳浓度为4％-6％。

4.根据权利要求2所述的利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物 的方法，其特征在于，在所述步骤S13中，所述预定时间为5-7天。

5.根据权利要求2所述的利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物 的方法，其特征在于，所述步骤S1还包括：

S14、将收集的所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞部分冻存。

6.根据权利要求1所述的利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物 的方法，其特征在于，所述步骤S2包括：

S21、对所述肿瘤细胞进行精密度检测和敏感度测试，筛选出满足药物筛选 要求的所述肿瘤细胞，并确定所述肿瘤细胞的正式接种数；

S22、将所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞分别按照正式接种数接种在96 孔板上，并将所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞分别分为实验组和对照组。

7.根据权利要求6所述的利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物 的方法，其特征在于，所述步骤S21包括：

S211、将所述肿瘤细胞分为低数目组、中数目组和高数目组并分别接种， 其中，所述低数目组的肿瘤细胞数为400-600，所述中数目组的肿瘤细胞数为 9000-11000，所述高数目组的肿瘤细胞数大于40000；

S212、培养预定时间后，分别测定所述低数目组、中数目组和高数目组的 RLU值，选择RLU平均值＞400000的最低肿瘤细胞数作为正式接种数。

8.根据权利要求1所述的利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物 的方法，其特征在于，所述步骤S3包括：

S31、提供多个备选药物，并将每个所述备选药物分别调配成多个浓度；

S32、将多个浓度的多个所述备选药物分别对所述肿瘤细胞和所述正常原代 细胞的实验组进行加药处理。