[发明专利]利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体地，涉及一种利用自体肿瘤与正常配对原 代细胞筛选肿瘤药物的方法。

背景技术

近几年来，肿瘤的发生率呈逐年增长的趋势，目前常规的治疗方法主要有手 术、放化疗、生物治疗等，而其中化疗所面对的群体又占主要部分，化疗是利用 化学药物阻止癌细胞的增殖、侵润、转移直至最终杀灭癌细胞的一种治疗方法， 它是一种全身性的治疗手段。但是由于化疗药物的选择性不强，在杀灭癌细胞的 同时，也会不可避免地损伤人体正常的细胞，从而出现药物的不良反应；如何使 病人接受化疗药物后，达到最佳的抗肿瘤作用，同时又能最大限度地降低化疗药 物对人体的损伤，成为目前肿瘤治疗过程中亟需解决的问题。

越来越多的证据表明，肿瘤的发生发展过程是肿瘤细胞与其生长的环境相 互作用的结果。即使在肿瘤发生的最早期，肿瘤细胞的失控型存活与生长也需要 其环境相应的改变才能维持，由于体内肿瘤组织多具有复杂的结构，包括增殖旺 盛的细胞、静止细胞和坏死组织等，具有明显的异质性，在同一肿瘤组织内部， 不同部位细胞对化疗药物的敏感性不同；在不同病人，同一肿瘤组织对于同种化 疗药物的敏感性也不同。所以无论是使用肿瘤细胞模拟人体内环境进行药物筛 选，还是其他的一些药物筛选方法(如原代细胞药物筛选等)，都不能真正解决 目前肿瘤治疗中药物的选择问题。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一。

为此，本发明提出一种利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物的方 法，该方法简单可行，可以筛选出药效好的肿瘤药物。

根据本发明实施例的利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物的方 法，包括以下步骤：S1、提供组织源相同的肿瘤细胞和正常配对的正常原代细 胞，并分别对其进行培养；S2、将所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞分别接种， 并将所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞分别分为实验组和对照组；S3、提供多个 针对该肿瘤的备选药物，并将多个所述备选药物分别对所述肿瘤细胞和所述正常 原代细胞的实验组进行加药处理；S4、通过ATP生物荧光药效检测方法检测并 分析各备选药物对所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞的抑制率，初筛得到候选药 物；S5、将候选药物组作用的所述肿瘤细胞组和所述正常原代细胞进行流式凋 亡检测，筛选出所述候选药物中对所述肿瘤细胞的抑制率最高且同时对所述正常 细胞的抑制率最低的药物，作为临床推荐药物。

根据本发明实施例的利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤药物的方 法，可以针对不同病人建立不同的药物筛选体系，判定不同肿瘤候选药物的药效， 并提供相应浓度的最佳肿瘤药物，保证在有效杀死肿瘤细胞的同时，最大限度地 降低药物对于病人的副作用。

另外，根据本发明上述实施例的利用自体肿瘤与正常配对原代细胞筛选肿瘤 药物的方法，还可以具有如下附加的技术特征：

根据本发明的一个实施例，所述步骤S1包括：S11、提供组织源相同的肿 瘤细胞和正常配对的正常原代细胞，并将所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞分别 吹散成单个细胞；S12、将所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞分别加入培养皿内 培养；S13、定期对所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞进行观察并拍照，同时进 行细胞传代，培养预定时间后，收集所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞。

根据本发明的一个实施例，在所述步骤S12中，所述肿瘤细胞和所述正常 原代细胞的培养温度为36.5℃-37.5℃，二氧化碳浓度为4％-6％。

根据本发明的一个实施例，在所述步骤S13中，所述预定时间为5-7天。

根据本发明的一个实施例，所述步骤S1还包括：S14、将收集的所述肿瘤 细胞和所述正常原代细胞部分冻存。

根据本发明的一个实施例，所述步骤S2包括：S21、对所述肿瘤细胞进行 精密度检测和敏感度测试，筛选出满足药物筛选要求的所述肿瘤细胞，并确定所 述肿瘤细胞的正式接种数；S22、将所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞分别按照 正式接种数接种在96孔板上，并将所述肿瘤细胞和所述正常原代细胞分别分为 实验组和对照组。