[发明专利]针对蜂蜜中MRJP1抗体对的制备方法、检测方法及试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及蜂蜜成分含量的测定技术，尤其涉及一种蜂蜜所含的由蜜蜂封后分泌 的内源性蜂王浆主蛋白MRJP1特异性双抗体的制备方法，及用双抗体检测掺假蜂蜜的双抗 体夹心方法等。

背景技术

蜂蜜是蜜蜂工蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物结合后，在巢脾中 经充分酿造形成的天然甜物质。我国是蜂蜜生产和出口大国，2012年全国产量达到45.16万 吨，占世界蜂蜜总产量的1/4；2013年出口蜂蜜12.5万吨，占世界蜂蜜贸易量的1/4。根据中 华人民共和国供销合作行业标准GH/T18796-2012《蜂蜜》对蜂蜜真实性的描述，“蜂蜜中不 得添加任何当前明确或不明确的添加物；如果在蜂蜜中添加其它物质,不应以’蜂蜜’或’ 蜜’作为产品名称或名称主词；采用我国国家标准GB/T18932.1(2012)《蜂蜜中碳-4植物 糖含量测定方法稳定碳同位素比率法》方法检测，蜂蜜中的碳-4植物糖含量不得大于7。” 由于蜂蜜掺假成本低廉，检测困难，不法商贩容易牟利，已严重扰乱蜂蜜市场秩序，导致产 品信任度严重下降，导致行业整体价格和效益下降。目前市场上最常见的蜂蜜掺假方式是 加入果葡糖浆、玉米糖浆、甜菜糖浆等，尤其是用大米糖浆勾兑的假蜂蜜，其理化指标和风 味完全可以通过欧盟标准，难以检测，严重影响了我国国际贸易声誉。近年来，蜂蜜市场鱼 龙混杂，掺假造假的事件不断被曝出。2015年3月，在十二届全国人大三次会议上，10名全国 人大代表提交了“严厉打击假劣蜂产品的建议”。2015年7月，国家食品药品监督管理总局在 其官网正式作出回应：现行蜂蜜国家标准无法鉴别蜂蜜的真假，将积极推动蜂蜜食品安全 国家标准的修订和蜂蜜掺假补充检验方法的建立。

为打击掺假蜂蜜，多年来国内外开展了大量以掺假物质：来自于甘蔗和玉米等碳 四植物蔗糖和高果糖浆，来源于碳三植物的大米糖浆为指标的检测方法研究。由于蜜蜂采 集的花粉来自于碳三植物，与甘蔗和玉米这两类植物产生的糖中C13同位素的比例不一样。 理论上可用碳四植物糖的同位素检测方法确定蜂蜜的“真假”。但不同的蜂蜜差异实在太 大，C13同位素偏移的范围也很大，很难准确判断真假。有了碳四检测法后，一些不良商家便 开始改为添加碳三糖，常见就是用碳三植物源的大米糖浆和甜菜糖浆，如果在蜂蜜中掺入 大米糖浆，碳四检测方法就无能为力了。随后发明了用高效液相色谱质谱联用(LC-MS)仪来 检测大米糖浆。但如果把大米糖浆水解转化成葡萄糖和果糖，即便同时使用碳四检测和LC- MS仪检测，都无法辨别是否掺假。