[发明专利]一种利用ISSR分子标记鉴定巴马香猪的方法有效
| 申请号： | 201610148907.1 | 申请日： | 2016-03-16 |
| 公开（公告）号： | CN105543406B | 公开（公告）日： | 2018-08-07 |
| 发明（设计）人： | 孙群;陈秋虹;耿琦;李婉丽;金玉兰;李松;孙宏虎;温文婷 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 成都天嘉专利事务所(普通合伙) 51211 | 代理人： | 赵丽 |
| 地址： | 610065 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 issr 分子 标记 鉴定 巴马 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种利用ISSR分子标记鉴定巴马香猪的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：
A、样品DNA提取；
B、PCR反应及产物检测；
C、UPGMA聚类分析，与标准品的相似系数≥0.94，即可鉴定样品为巴马香猪；
在步骤B中，所述PCR反应中所用引物的核苷酸序列为5’-(ATG)6-3’。
2.如权利要求1所述的利用ISSR分子标记鉴定巴马香猪的方法，其特征在于：在步骤B中，所述 PCR反应的体系为：模板DNA 1.5 μL、引物1 μL、2×Taq PCRMaster Mix 12.5 μL、ddH2O补足至25 μL；PCR反应程序为：94℃预变性5 min，然后94℃变性45 s，51 ℃退火45s，72℃延伸1.5 min，共35个循环，最后72℃总延伸7 min。
3.如权利要求1所述的利用ISSR分子标记鉴定巴马香猪的方法，其特征在于：在步骤B中，所述PCR产物检测方法为：用1.5 %琼脂糖凝胶电泳检测。
4.如权利要求1所述的利用ISSR分子标记鉴定巴马香猪的方法，其特征在于：在步骤C中，所述UPGMA聚类分析是ISSR电泳图成像后，利用Quantity One软件对扩增片段进行UPGMA聚类分析。
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