[发明专利]核酸提取用磁性微珠的制备方法

说明书

核酸提取用磁性微珠的制备方法，涉及磁性微珠的制备方法。本发明是要解决现有生物磁珠粒径大，表面能小，核酸吸附效率低的问题。方法1：一、制备Fe₃O₄/SiO₂磁性微珠；二、磁性微珠洗涤；三、制备表面键合环氧基的磁性微珠；四、制备表面键合二醇基的磁性微珠。方法2：一、制备Fe₃O₄/SiO₂磁性微珠；二、磁性微珠洗涤；三、制备表面键合环氧基的磁性微珠；四、制备表面包覆亚氨基二乙酸的磁性微珠。本发明方法制备的磁珠粒径小，为纳米级；提高了磁珠的表面能，延长磁珠在提取液中的悬浮时间，能够与目标提取物更有效地接触，提高目标提取物的提取率。本发明用于制备核酸提取用磁性微珠。

技术领域

本发明涉及磁性微珠的制备方法。

背景技术

随着分子生物学技术的不断广泛应用，分子生物学技术已从以往的小规模的实验室研究逐渐转变成诸如疾病诊断、基因组测序、疾病基因的流行病学调研等需要大规模的程序化的操作的实用手段。以人类基因组测序为例，需要年复一年的核酸提取、纯化、测序。许多优秀的高级科研人员的大量的时间被花费在简单的重复劳动之中，实在是一种巨大的浪费。同时手工操作的不可避免的不规范性容易造成误差，人类基因组测序一般要重复3次以上，又进一步加重工作强度。

磁性高分子微珠简称磁性微珠，是由磁性材料与高分子材料通过化学或物理方法复合而成的一种具有众多优异性能的功能材料。磁性材料主要有铁酸盐、铁磁矿、纯铁粉、Fe₃O₄等，高分子材料有天然高分子材料及合成高分子材料两种，天然高分子材料有淀粉、明胶、纤维素、壳聚糖等，合成高分子材料有聚苯乙烯、聚苯乙烯醇、消化纤维等。磁性微珠可以通过磁珠表面改性或者功能团嫁接等方式将功能团(-OH、-COOH、NH₂等)引入磁性微珠表面，进而得到具有功能化的磁性微珠。

磁性高分子微珠作为近年发展起来的一种新型磁性材料，不但具有纳米效应，即表面效应、小尺寸效应、宏观量子隧道效应和体积效应，还具有磁学性质，如超顺磁性与高磁化率等特性。其应用已经从传统的技术领域发展到高新技术领域，从单纯的磁学范围扩展到与磁学相关的交叉学科领域。以核酸分离领域应用最为广泛。

传统的核酸分离需要乙醇沉淀、氯仿萃取、离心分离、层膜析出、清晰、富集等操作，其步骤繁琐、耗时费力，而分离效果及效率并不理想。磁性微珠在核酸分离中的应用，加快了核酸富集分离的自动化程度，提高了分离效果和效率，大大降低了其他物质对核酸的分离干扰，对推进核酸快速富集分离提取技术的发展起到了积极的作用。

目前磁珠纯化技术正在朝着全自动操作，提取和分离样本多样化、系统化方向发展。国产化磁珠的研制成功必将大幅度提高生物学科研工作效率、推动生物学科研究和产业化快速发展。但现有提取核酸用的生物磁珠粒径大，存在表面能小、核酸吸附效率低的问题。

发明内容

本发明是要解决现有生物磁珠粒径大，表面能小，核酸吸附效率低的问题，提供核酸提取用磁性微珠的制备方法。

本发明核酸提取用磁性微珠的制备方法，按以下步骤进行：