[发明专利]诱导造血干祖细胞增殖和红系分化的方法及其应用

权利要求书

1.一种诱导造血干祖细胞增殖和红系分化的方法，其特征在于，包括：

利用第一培养基对单个核细胞进行第一培养，以便得到扩增后的造血干细胞，其中，所述第一培养基为添加了第一添加剂的Stemspan无血清培养基或SCGM无血清培养基，且所述第一添加剂包括重组人干细胞因子、重组人促红素、白介素-3、白介素-6和FMS样酪氨酸激酶3；以及

利用第二培养基对所述扩增后的造血干细胞进行第二培养，以便得到红系祖细胞，其中，所述第二培养基为添加了第二添加剂的SCGM无血清培养基，且所述第二添加剂包括重组人干细胞因子、胰岛素样生长因子1、重组人促红素、转鉄蛋白、地塞米松、谷胺酰胺和类脂。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一培养基为添加了所述第一添加剂的所述Stemspan培养基。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述第一培养基中，

所述重组人干细胞因子的浓度为40-60ng/ml；

所述重组人促红素的浓度为5-15ng/ml；

所述白介素-3的浓度为15-25ng/ml；

所述白介素-6的浓度为5-15ng/ml；

所述FMS样酪氨酸激酶3的浓度为40-60ng/ml。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述第二培养基中，

所述重组人干细胞因子的浓度为80-120ng/ml；

所述胰岛素样生长因子1的浓度为30-50ng/μl；

所述重组人促红素的浓度为3-7U/ml；

所述转鉄蛋白的浓度为80-120μg/ml；

所述地塞米松的浓度为0.8-1.2μM；

所述谷胺酰胺的浓度为1.5-2.5mM；

所述类脂的浓度为1.5-2.5mM。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一培养的时间为5-10天。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第二培养的时间为10-21天。

7.一种用于诱导造血干祖细胞增殖和红系分化的试剂盒，其特征在于，包括：

第一培养基，所述第一培养基用于对造血干祖细胞进行第一培养，以便得到扩增后的造血干细胞；以及

第二培养基，所述第二培养基用于对所述扩增后的造血干细胞进行第二培养，以便得到红系祖细胞，

其中，所述第一培养基和所述第二培养基是如权利要求1-6中任一项所述的诱导造血干祖细胞增殖和红系分化的方法定义的。

8.一种用于诱导造血干祖细胞增殖和红系分化的系统，其特征在于，包括：

第一培养装置，所述第一培养装置用于利用第一培养基对造血干细胞进行第一培养，以便得到扩增后的造血干细胞；以及

第二培养装置，所述第二培养装置与所述第一培养装置相连，所述第二培养装置用于利用第二培养基对所述扩增后的造血干细胞进行第二培养，以便得到红系祖细胞，

其中，所述第一培养基和所述第二培养基是如权利要求1-6中任一项所述的诱导造血干祖细胞增殖和红系分化的方法定义的。