[发明专利]一种筛选促进重金属植物修复根际细菌的方法

说明书

技术领域

本发明涉及重金属污染土壤生物修复技术领域，具体涉及一种筛选 促进重金属植物修复根际细菌的方法。

背景技术

随着工业的发展，水污染、土壤污染、大气污染日趋严重，其中， 由于采矿、废气排放、污水灌溉和使用重金属超标制品等人为因素所导 致的重金属污染由于其难以处理对人体健康造成了较为严重的危害。

重金属与有机物污染不同，很难被微生物降解，修复重金属污染土 壤的途径之一是通过超富集植物吸附吸收。但由于植物根系环境中的微 生物、根系、土壤酶、金属离子之间存在复杂的关系，所以需从植物根 系及其周边环境中筛选出有益根际微生物。一方面，有益根际微生物会 促进植物的生长、有助于提高植物的修复效率。如科学家把从污染土壤 中分离的菌根菌接种到超富集植物蜈蚣草中，发现菌根菌的接种显著增 加了植物对As的吸收和植物中的含As量。另一方面，有益根际微生物 还具有对重金属毒性的抗性，能更好地适应重金属污染环境，且不会对 生态系统造成二次污染。因此，筛选促进重金属植物修复的根际细菌是 重金属污染土壤修复技术的一个重要领域。目前，传统的筛选方法是采 用液体摇瓶培养法筛选，这种方法存在的主要缺点是仅能筛选到在悬浮 液体中快速生长的微生物，而具有吸附特性的根际有益菌很难被筛选 到。

发明内容

本发明的目的在于提供一种筛选促进重金属植物修复根际细菌的 方法，用于解决采用现有的液体摇瓶培养法仅能筛选到在悬浮液体中快 速生长的微生物，而很难筛选到具有吸附特性的根际有益菌的问题。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种筛选促进重金 属植物修复根际细菌的方法，包括如下步骤：

(1)对植物和土壤样品进行采集操作和预处理操作；

(2)经步骤(1)采集后的样品进行富集处理；

(3)经富集处理后的培养物进行初筛操作；

(4)对初筛后的培养物进行分离处理；

(5)分离得到的菌种进行复筛操作；

所述步骤(2)的富集处理包括富集瓶制作过程、向富集瓶中加入 样品过程和菌种培养过程，所述富集瓶制作过程中需向试剂瓶中加入吸 附载体、重金属化合物、营养肉汤和制霉菌素。

相比于现有技术，本发明所述的筛选促进重金属植物修复根际细菌 的方法具有以下优势：本发明首先对植物和土壤样品进行采集和预处 理，之后对其进行富集处理，并在富集瓶的制作过程中加入吸附载体、 重金属化合物、营养肉汤和制霉菌素，其中，营养肉汤和制霉菌素是为 了供给给细菌营养和在富集过程中起到抗霉菌的作用。本发明相对于传 统的方法还在富集过程中添加有吸附载体和重金属化合物，吸附载体的 添加能使易吸附的菌种大部分均吸附在吸附载体上，方便后期对于固体 物质的处理和对于菌种的提取分离，也更易于对吸附性强的菌种的提 取，重金属化合物的添加在富集瓶中使细菌形成了一个偏食的环境，促 进细菌吸附重金属化合物特性的显现。在富集处理后对得到的固体物质 进行初筛和分离。最后，通过富集植物培育直接复筛及验证，观测植物 生长状况及检测植物体内重金属的含量，筛选到有促进植物对重金属吸 附吸收功能的有益菌。

本发明提供了一种直接、有效筛选促进重金属植物修复根际细菌的 新方法，该方法能更快更准确地筛选到有促进植物对重金属吸附吸收功 能的有益菌，提高了筛选效率。使筛选出的具有吸附特性的根际有益菌 接种到植物后对重金属污染具有更强的治理能力。

附图说明

通过阅读下文优选实施方式的详细描述，各种其他的优点和益处对 于本领域普通技术人员将变得清楚明了。附图仅用于示出优选实施方式 的目的，而并不认为是对本发明的限制。在附图中：

图1示出了根据本发明所述的筛选促进重金属植物修复根际细菌的 方法的步骤流程图。

具体实施方式

本发明提供了许多可应用的创造性概念，该创造性概念可大量的体 现于具体的上下文中。在下述本发明的实施方式中描述的具体的实施例 仅作为本发明的具体实施方式的示例性说明，而不构成对本发明范围的 限制。

下面结合附图和具体的实施方式对本发明作进一步的描述。