[发明专利]从漆树木粉中提取具有抗氧化活性的黄颜木素和3,4’,7‑三羟基二氢黄酮醇的方法

权利要求书

1.从漆树木粉中提取具有抗氧化活性的黄颜木素和3,4’,7-三羟基二氢黄酮醇的方法，其特征在于由以下步骤组成：

第一步

将漆树木粉，干燥去渣，按质量体积比为1:10~1:30 g/mL，加入质量分数为50~95%的乙醇或甲醇水溶液，减压回流提取2~3次，每次1~3h，过滤，滤液合并，于40~60℃下减压蒸发除去溶剂，得到含水粗提液；

第二步

粗提液按质量体积比1:3~1:10 g/mL加入蒸馏水，搅拌溶解，加入石油醚萃取1~5次，分离，在40~60℃下减压蒸发除去溶剂，得到石油醚萃取物；水层继续用乙酸乙酯萃取1~5次，分离，在40~60℃下减压蒸发除去溶剂，干燥得到乙酸乙酯萃取物;

第三步

将乙酸乙酯萃取物与硅胶填料按质量比1:15-50吸附，柱长50-150 cm，柱直径4-20 cm，采用不同比例石油醚与乙酸乙酯进行洗脱，收集抗氧化活性较高的石油醚:乙酸乙酯体积比为7:3-3:7(v:v)的部位，真空浓缩，回收溶剂，得到富含黄颜木素和3,4’,7-三羟基二氢黄酮醇的提取物；

第四步

将富含黄颜木素和3,4’,7-三羟基二氢黄酮醇的提取物与中低压色谱填料按质量比1:15-50吸附，中压柱柱长20-80 cm，柱直径2-8 cm，采用不同比例的洗脱剂进行洗脱，柱压为0.5-10 MPa, 检测波长220-280 nm，流速3-50 mL/min，分别收集黄颜木素和3,4’,7-三羟基二氢黄酮醇部位，真空浓缩，回收溶剂，得到黄颜木素和3,4’,7-三羟基二氢黄酮醇样品，将黄颜木素和3,4’,7-三羟基二氢黄酮醇进行HPLC分析，含量为95%以上。

2.根据权利要求1所述的从漆树木粉中提取具有抗氧化活性的黄颜木素和3,4’,7-三羟基二氢黄酮醇的方法，其特征在于第四步中低压色谱填料为孔径为60 Å，20-60 µm的ODS C18、C8和Sephedex LH-20材料中的一种，洗脱剂为甲醇、乙醇和体积比0.5%-2%(v:v)的醋酸水中的一种或几种的混合溶液。

3.根据权利要求1所述的从漆树木粉中提取具有抗氧化活性的黄颜木素和3,4’,7-三羟基二氢黄酮醇的方法，其特征在于HPLC分析条件为：4.6×250mm, 5μm 的C18 Gold AQ 反相柱, 流动相为体积比为40:60(v:v)的甲醇:体积比0.5-1%(v/v)醋酸水溶液，紫外检测器，检测波长为280 nm, 流速为1mL/min。