[发明专利]检测小麦是否含有簇毛麦6VS染色体臂的成套试剂与分子标记

权利要求书

1.检测或辅助检测小麦是否含有簇毛麦6VS染色体臂的成套试剂，由A-P与B-P、C-P、D-P和E-P中的至少一种组成；

所述A-P由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA组成；

所述B-P由序列表中序列3和序列4所示的两条单链DNA组成；

所述C-P由序列表中序列5和序列6所示的两条单链DNA组成；

所述D-P由序列表中序列7和序列8所示的两条单链DNA组成；

所述E-P由序列表中序列9和序列10所示的两条单链DNA组成。

2.检测或辅助检测小麦是否含有簇毛麦6VS染色体臂的引物对，为权利要求1中所述A-P。

3.检测或辅助检测小麦是否含有簇毛麦6VS染色体臂的成套试剂，由权利要求1所述成套试剂或权利要求1中所述A-P与X1组成；所述X1为F-P、G-P和H-P中的至少一种；

所述F-P由序列表中序列11和序列12所示的两条单链DNA组成；

所述G-P由序列表中序列13和序列14所示的两条单链DNA组成；

所述H-P由序列表中序列15和序列16所示的两条单链DNA组成。

4.检测或辅助检测小麦是否含有簇毛麦6VS染色体臂的系统，为系统A1、系统A2或系统A3；

所述系统A1由权利要求1所述成套试剂与进行PCR扩增所需的试剂和/或仪器组成；

所述系统A2由权利要求1中所述A-P与进行PCR扩增所需的试剂和/或仪器组成；

所述系统A3由权利要求3所述成套试剂与进行PCR扩增所需的试剂和/或仪器组成。

5.检测或辅助检测小麦是否含有簇毛麦6VS染色体臂的方法，为下述R或S：

R、下述R1)或R2)：

R1)包括R11)和R12)：

R11)分别以待测小麦、参比小麦和簇毛麦的基因组DNA为模板，用5种引物对分别进行PCR扩增，得到所述5种引物对的待测小麦PCR产物、所述5种引物对的参比小麦PCR产物和所述5种引物对的簇毛麦PCR产物；所述参比小麦为不含簇毛麦6VS染色体臂的小麦，作为确定簇毛麦特异条带的参比；

R12)将所述5种引物对的待测小麦PCR产物、所述5种引物对的参比小麦PCR产物和所述5种引物对的簇毛麦PCR产物进行电泳，根据电泳结果确定所述5种引物对的待测小麦PCR产物中是否含有簇毛麦相应引物对的特异条带，如果所述5种引物对的待测小麦PCR产物中至少有一种引物对的待测小麦PCR产物中含有簇毛麦相应引物对的特异条带，所述待测小麦含有或候选含有簇毛麦6VS染色体臂；如果所述5种引物对的待测小麦PCR产物中均不含有簇毛麦相应引物对的特异条带，所述待测小麦不含或候选不含簇毛麦6VS染色体臂；

所述5种引物对为权利要求1中所述A-P、所述B-P、所述C-P、所述D-P和所述E-P；

R2)包括R21)和R22)：

R21)以待测小麦的基因组DNA为模板，用所述5种引物对分别进行PCR扩增，得到所述5种引物对的待测小麦PCR产物；

R22)检测R21)所述5种引物对的待测小麦PCR产物的序列，如所述5种引物对的待测小麦PCR产物中含A、B、C、D和E中的至少一种，所述待测小麦含有或候选含有簇毛麦6VS染色体臂；如所述5种引物对的待测小麦PCR产物中均不含A、B、C、D和E中的任一种或任几种，所述待测小麦不含或候选不含簇毛麦6VS染色体臂；

S、下述S1)或S2)：

S1)包括S11)和S12)：

S11)分别以待测小麦、参比小麦和簇毛麦的基因组DNA为模板，用8种引物对分别进行PCR扩增，得到所述8种引物对的待测小麦PCR产物、所述8种引物对的参比小麦PCR产物和所述8种引物对的簇毛麦PCR产物；所述参比小麦为不含簇毛麦6VS染色体臂的小麦，作为确定簇毛麦特异条带的参比；

S12)将所述8种引物对的待测小麦PCR产物、所述8种引物对的参比小麦PCR产物和所述8种引物对的簇毛麦PCR产物进行电泳，根据电泳结果确定所述8种引物对的待测小麦PCR产物中是否含有簇毛麦相应引物对的特异条带，如果所述8种引物对的待测小麦PCR产物中至少有一种引物对的待测小麦PCR产物中含有簇毛麦相应引物对的特异条带，所述待测小麦含有或候选含有簇毛麦6VS染色体臂；如果所述8种引物对的待测小麦PCR产物中均不含有簇毛麦相应引物对的特异条带，所述待测小麦不含或候选不含簇毛麦6VS染色体臂；

所述8种引物对为权利要求1中所述A-P、所述B-P、所述C-P、所述D-P和所述E-P以及权利要求3中所述F-P、所述G-P、所述H-P；

S2)包括S21)和S22)：

S21)以待测小麦的基因组DNA为模板，用所述8种引物对分别进行PCR扩增，得到所述8种引物对的待测小麦PCR产物；

S22)检测S21)所述8种引物对的待测小麦PCR产物的序列，如所述8种引物对的待测小麦PCR产物中含有A、B、C、D、E、F、G和H中的至少一种，所述待测小麦含有或候选含有簇毛麦6VS染色体臂；如所述8种引物对的待测小麦PCR产物中均不含A、B、C、D、E、F、G和H中的任一种或任几种，所述待测小麦不含或候选不含簇毛麦6VS染色体臂；

所述A为序列17所示的DNA分子；

所述B为序列18所示的DNA分子；

所述C为序列19所示的DNA分子；

所述D为序列20所示的DNA分子；

所述E为序列21所示的DNA分子；

所述F为序列22所示的DNA分子；

所述G为序列23所示的DNA分子；

所述H为序列24所示的DNA分子；

所述簇毛麦相应引物对的特异条带为同一种引物对的簇毛麦PCR产物含有但所述同一种引物对的所述参比小麦的PCR产物不含有的条带。