[发明专利]检测小麦是否含有簇毛麦6VS染色体臂的成套试剂与分子标记

说明书

本发明公开了检测小麦是否含有簇毛麦6VS染色体臂的成套试剂与分子标记。本发明公开的的成套试剂，由A‑P与B‑P、C‑P、D‑P和E‑P中的至少一种组成；所述A‑P由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA组成；所述B‑P由序列表中序列3和序列4所示的两条单链DNA组成；所述C‑P由序列表中序列5和序列6所示的两条单链DNA组成；所述D‑P由序列表中序列7和序列8所示的两条单链DNA组成；所述E‑P由序列表中序列9和序列10所示的两条单链DNA组成。本发明的成套试剂和方法可用于小麦杂交群体的筛选、鉴定与辅助选育具有簇毛麦优良性状(如抗白粉病)的小麦新品系/品种。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中检测小麦遗传背景中是否含有簇毛麦6VS染色体臂的成套试剂与分子标记。

背景技术

簇毛麦Dasypyrum villosum(L.)P.Candargy(syn.Haynaldia villosa Schur)是小麦族簇毛麦属的一个二倍体种，2n＝2x＝14。它起源于地中海的东北部，从南欧的法国南部到里海，西南亚，俄罗斯和高加索地区(De Pace等1995；Frederiksen 1991)，是一种杂草类植物，生长在恶劣、干旱的环境中(Agnieszka Gradzielewska,2006)。由于其颖壳脊上和外稃顶端有丛生的毛状物，故名之。

簇毛麦含有许多生物胁迫和非生物胁迫抗性基因及优质基因，是改良小麦的优良基因源。Sears、Lukaszewski和刘大均等先后将簇毛麦基因组转移到小麦的遗传背景，育成3套染色体附加系。根据簇毛麦来源的不同，Qi等(1998)首先将Sears培育的小麦-簇毛麦附加系用DA1V#1-DA7V#1表示，将南京农业大学培育的小麦-簇毛麦附加用DA1V#2-DA7V#2表示，Liu等(2011)随后将A.J.Lukaszewski培育的附加系用DA1V#3-DA7V#3表示，申请人将前苏联簇毛麦No.1026衍生的6VS染色体命名为6V#4S(Lin等，2013)。

6V#1S，6V#2S，6V#3S和6V#4S染色体臂的区别仅在于来源地不同。6V#1S，6V#2S，6V#3S和6V#4S染色体短臂来源不同对小麦白粉病抗性也表现不同。携带6V#1S和6V#3S染色体的小麦不抗白粉病，而具有6V#2S和6V#4S染色体的小麦对白粉病均表现免疫(Liu等，2011)。

陈佩度等(1995)利用6V#2(6A)异代换系与扬麦5号杂交，结合杂种后代的γ-射线处理，成功选育出抗白粉病T6V#2S·6AL易位系，其抗病基因命名为Pm21(Qi等，1996)。陈孝等(1996)利用来自前苏联的簇毛麦No.1026培育了硬粒小麦-簇毛麦双二倍体TH1，TH2和TH3，及抗白粉病的6V#4(6D)代换系94G22-1、94G25-1、94G32-1和94G33-1，利用TH3与小麦品种宛7107杂交、回交，未成熟胚培养及/花药培养等方法，培育出6V#4S·6DL染色体易位系Pm97033、Pm97034和Pm97035(Li等，2005)。

虽然6V#2S·6AL易位系和6V#4S·6DL易位系对小麦条纹花叶病毒及其传媒载体-小麦卷曲螨的敏感性不同；在染色体水平上，2条外源染色体臂也与不同的小麦染色体建立了连锁关系，但二者对白粉病菌所有小种表现免疫，故在白粉病抗性表型上难于相互区分。