[发明专利]一种重乙酰化肝素修饰物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种而环己基脲修饰的N位脱硫酸化再乙酰化低抗凝血性肝素，以下简称重乙酰化肝素修饰物。所述重乙酰化肝素修饰物的所述重乙酰化肝素修饰物的分子量在2K-50K之间。

2.制备权利要求1所述的重乙酰化肝素修饰物的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)制备低抗凝血性肝素：将肝素先经高碘酸钠氧化，然后再经硼氢化钠还原得到所述低抗凝血性肝素；也可以经亚硝酸降解先制备低分子肝素，再经高碘酸钠氧化，硼氢化钠还原制备低抗凝血性低分子肝素。

(2)制备N位脱硫酸化低抗凝血性肝素：将上述低抗凝血性低分子肝素溶于水，加二甲基亚砜(DMSO)调整：水与DMSO体积比在1∶(5-99)，于10-80℃条件下反应，反应时间为0-120分钟，制备不同脱硫酸化程度的N位脱硫酸化低抗凝血性肝素(反应中也可以添加1％-4％重量比的催化剂，如吡啶，二甲氨基吡啶)。

3.制备重乙酰化肝素修饰物：在溶剂中，所述N位脱硫酸化低抗凝血性肝素与二环己基碳二亚胺(DCC)、乙酸酐按照重量比为20∶(1～10)∶(0.1～5)发生反应，得到所述重乙酰化肝素修饰物。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：在制备疏水化低抗凝血性肝素之前，先将所述N位脱硫酸化低抗凝血性肝素进行预处理，所述预处理为：将N位脱硫酸化低抗凝血性肝素溶于水中，过离子交换柱，以去离子水为洗脱液，收集洗脱液，并向所述洗脱液中加入碱成盐，冷冻后减压干燥即得；优选地，所述碱为三丁胺。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：步骤(2)的具体操作为：将所述N位脱硫酸化低抗凝血性肝素溶于溶剂中，向所述溶剂中 加入二环己基碳二亚胺和乙酸酐在10-80℃条件下反应，反应完全后向反应液中加入水，过滤去除二环己基脲固体及杂质，得滤液，向所述滤液中加入醇类溶剂析出固体，所述固体即为重乙酰化肝素修饰物；优选地，所述溶剂为二甲基甲酰胺或二氯甲烷；优选地，所述醇类溶剂为乙醇。

6.权利要求1或2所述的重乙酰化肝素修饰物或权利要求3-5任一所述的制备方法得到的重乙酰化肝素修饰物作为抗肿瘤药物或者药物载体在药物制备中的应用，其特征在于：所述药物为喜树碱及其衍生物类。

7.一种以权利要求1或2所述的重乙酰化肝素修饰物，或权利要求3-5任一所述的重乙酰化肝素修饰物为载体制备载体药物的制备方法，其特征在于：所述方法为：将喜树碱或喜树碱衍生物与所述疏水化低抗凝血性肝素在碱性条件下进行超声处理，得混合溶液；将所述混合溶液微孔过滤，冷冻干燥，即得所述载体药物。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述喜树碱或喜树碱衍生物与所述重乙酰化肝素修饰物的重量比为1∶1-1∶20，优选为1∶1-1∶10。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于：所述方法为：按照喜树碱或喜树碱衍生物与重乙酰化肝素修饰物的重量比为1∶1-1∶10计，先将喜树碱或喜树碱衍生物溶于pH值为9～12的碱性水溶液中，然后加入重乙酰化肝素修饰物，在10-80℃条件下使用20～60KHz的超声波超声处理直至形成载体药物混合溶液；将所述混合溶液微孔过滤，中和至pH7.4并冷冻干燥即得所述载体药物。

10.根据权利要求7-9任一所述的方法，其特征在于：所述超声处理采用频率为20～60KHz的超声波，超声处理直至溶液成载体药状态(也可以用各种乳化方法制备载体药物)；和/或，所述微孔过滤采用0.1-0.3μm 的微孔过滤滤膜；和/或，冷冻干燥在温度-40-0℃，真空条件下进行。根据权利要求7-9所述的方法，也可以用常规乳化方法代替超声处理。