[发明专利]一种灯笼果提取物及其在制备肝脏细胞氧化损伤抑制剂中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种灯笼果提取物及其在制备肝脏细胞氧化 损伤抑制剂中的应用。

背景技术

灯笼果(PhysalisperuvianaL.)，茄科酸浆属一年生或多年生的草本植物，灯笼 果成熟后呈黄色，可鲜食或加工成各种食品(果酱、果脯、罐头及沙拉等)。灯笼果酸 甜可口，营养丰富，含有较高的维生素C，并含有大量的活性物质，主要包括：多酚 类、黄酮类和有机酸类成分。灯笼果是一种全草药用植物，在民间，包括灯笼果在内 的酸浆属植物广泛用于预防和治疗癌症、白血病，抑菌、利尿、抗炎及免疫调节等。

自由基被认为是引起人体衰老和某些慢性疾病发生的原因之一，当人体内的自由 基产生过多或清除过慢时，就会转而攻击各种细胞器官，损害机体的组织，进而引起 慢性疾病及衰老效应并诱发各种疾病。

丙烯酰胺(Acrylamide，AA)是一种具有神经毒性和潜在致癌性的化学物质国际 癌症研究机构(IARC)1994年对其致癌性进行了评价，将丙烯酰胺列为2类致癌物 (2A)即人类可能致癌物。丙烯酰胺广泛存在于日常生活的多种物质中，许多食物中 含有丙烯酰胺，尤其是油炸、烘烤类高淀粉食物，饮水、吸烟、化妆品和包装材料中 也都含有丙烯酰胺。张希春等(张希春，张敏爱，丙烯酰胺肝脏代谢与细胞色素P450 2E1蛋白表达[J].现代预防医学，2007，34(5):910-915)以1.0，2.0，4.0mmol/ml3 个剂量的AA与大鼠肝切片共同孵育，发现随着AA浓度的增加，肝切片代谢生成的 GA也随之增加，CYP2E1的表达也增加。肝脏是人体生物转化和解毒的重要器官，是 AA进入人体后最初的代谢场所，能聚集高浓度的AA，而肝脏细胞色素P450中的 CYP2E1作为一种代谢外来异物的单氧合酶，可将AA氧化为GA，而GA比AA更具 细胞毒性。

因此，研制一种对肝脏损伤有保护作用的物质，尤其是由丙烯酰胺导致的肝脏损 伤有保护作用的物质是很有必要的。

发明内容

本发明公开了一种灯笼果提取物，采用模拟人体胃肠道消化的方式制备得到。采 用胃蛋白酶、胰蛋白酶等制备灯笼果提取物。本发明灯笼果提取物含有人体最终吸收 的有效成分，由于采用体外模拟的方式，最大限度的保留了有效成分，其功能性具有 实用性；而通过传统方法提取的灯笼果产物，进入人体后，会有部分的有效物质被人 体消化系统分解消化，因而功能性具有不可预测性，不能代表进入人体后的真实情况。

一种灯笼果提取物，提取步骤如下：

(1)灯笼果鲜果与水等质量混合打浆，用HCl调pH至1.5～2，加入胃蛋白酶， 在37℃、200～300rpm下水浴振荡2～3h；

(2)取步骤(1)得到的混合浆液，用NaOH调pH至6，再加入胰液，然后用 NaHCO3调pH至7.2～7.5，在37℃、200～300rpm下水浴振荡2～3h后，在5000～8000 rpm条件下离心10～15min得到上清液；

(3)取步骤(2)上清液经超滤膜过滤后截留分子量大于5kDa的成分，滤出液 经真空冷冻干燥，得到灯笼果提取物；

以质量百分比计，所述灯笼果提取物中有效成分：总酚含量为45.57％-49.73％， 总黄酮含量为1.95％-5.32％，Vc含量为1.56％-1.79％，咖啡酸含量为1.02％-1.51％， 绿原酸含量为0.81％-1.28％，原花青素含量为0.01％-0.05％，总多糖含量为 41.37％-43.24％，总还原糖含量为0.42％-0.53％。

作为优选，步骤(1)中，所述HCl的浓度为5mol/L。

作为优选，步骤(1)中，所述胃蛋白酶的加入量为2000～4000单位胃蛋白酶/20g 匀浆。

作为优选，步骤(2)中，所述NaOH的浓度为1mol/L。

所述NaHCO3的浓度为1mol/L。

作为优选，步骤(2)中，所述胰液中胰酶的含量为5～6mg/mL，胆盐的含量为 20～30mg/mL；

所述胰液的加入量为5mL/18mL混合匀浆。

本发明还公开了灯笼果提取物在制备肝脏细胞氧化损伤的抑制剂中的应用，拓展 了灯笼果的应用领域。

进一步公开了灯笼果提取物在制备由丙烯酰胺诱导的肝脏细胞氧化损伤的抑制 剂中的应用。