[发明专利]迅速测量油田污水和成品油中细菌含量的方法

权利要求书

1.一种迅速测量油田污水和成品油中细菌含量的方法，在液体样品中细菌含量测量装置上，进行液体样品中细菌含量的测量；所述装置包括箱体、细菌富集和核酸分子提取设备，所述细菌富集和核酸分子提取设备包括试剂管放置位置(1)和试剂管放置位置(4)、滤膜(2)、吸附层(3)反应池(5)、光源(6)、滤光片(7)、感光器(8)以及至少四个阀门，所述试剂管放置位置(1)底部与滤膜(2)上方空间连通，滤膜(2)下方空间分为两路，一路与阀门a入口端相连，另一路与阀门b入口端相连，阀门a出口端与废液池相连，阀门b出口端通过管道与吸附层(3)入口侧相连，吸附层(3)出口侧的管道分为两路，一路与阀门c入口端相连，阀门c出口端与废液池相连，另一路经过阀门d后与反应池(5)相连；试剂管放置位置(4)底部与通过管道与阀门b与吸附层入口侧之间的管道相连；光源(6)为反应池(5)提供染料分子激发能量，产生的荧光透过滤光片(7)后由感光器(8)接收；滤膜(2)上方空间的顶部、试剂管放置位置(4)的底部均设有金属尖刺，当试剂管放置在试剂管放置位置(1)或试剂管放置位置(4)上时可以刺破试剂管底部的铝箔；油田污水和成品油中细菌含量的测量步骤包括：

(a)在试剂管中装入样品，放置于试剂管放置位置(1)，试剂管底部铝箔包装被下部金属尖刺破，液体流入滤膜上方，小于滤膜孔径的液体穿过滤膜后进入废液池；

(b)当试剂管中的样品全部流过滤膜后，程序自动控制试剂管更替为预置在箱体内的盛装乙醇溶液的试剂管，重复上述加压流程以冲洗滤膜，然后继续自动控制试剂管更替为盛装去离子水或缓冲液的试剂管进行冲洗操作；

(c)对滤膜的冲洗完成后，在试剂管放置位置(1)上更换为盛装细菌裂解液的试剂管，将试剂管中的细菌裂解液流经吸附层(3)后进入废液池；

(d)在试剂管放置位置(4)上放置盛装洗涤液的试剂管进行冲洗，移除细菌裂解液中的杂质；

(e)冲洗结束后，在试剂管放置位置(4)上放置盛装缓冲液的试剂管，缓冲液流经吸附层3时将DNA洗脱下来，冲洗至反应池(5)；

(f)当核酸放大反应在反应池(5)中发生时，光源(6)发出的光激发反应池(5)中的染料分子，产生的荧光由感光器(8)接收，染料分子的浓度与溶液中核酸分子的浓度正相关，由此判断核酸分子的初始浓度；

当试剂管放置在试剂管放置位置(1)上时，在试剂管上部放置活塞，将试剂管中的试剂向下压入滤膜(2)上方的空间中。

2.根据权利要求1所述迅速测量油田污水和成品油中细菌含量的方法，其特征在于所述细菌富集和核酸分子捕捉设备集成在所述箱体内。

3.根据权利要求1所述迅速测量油田污水和成品油中细菌含量的方法，其特征在于阀门a～阀门d为程序控制的电磁阀，或采用微流控的微阀技术，由气泵控制其开关。

4.根据权利要求1所述迅速测量油田污水和成品油中细菌含量的方法，其特征在于反应池(5)的上方为开口或透光性材料，内部预置反应母液或冷冻干燥后的试剂球，核酸洗脱液流入反应池(5)后与预置溶液或试剂球混合。

5.根据权利要求1所述迅速测量油田污水和成品油中细菌含量的方法，其特征在于感光器(8)出的信号被送至信号处理单元进行分析。

6.根据权利要求1所述迅速测量油田污水和成品油中细菌含量的方法，其特征在于试剂管放置位置(1)或(4)置于较高位置，便于液体下流至较低位置。

7.根据权利要求1所述迅速测量油田污水和成品油中细菌含量的方法，其特征在于当采用PCR方法时，需要在反应池(5)周边设置快速加热-冷却模块以实现变性-退火-延伸的温度循环；当采用等温放大方法的时候，反应池周围只需要设置加热模块即可。

8.根据权利要求1所述迅速测量油田污水和成品油中细菌含量的方法，其特征在于试剂管的更换通过自动控制系统完成。