[发明专利]柚皮素眼用组合物的质量控制方法

权利要求书

1.使用高效液相色谱法对柚皮素眼用组合物中的活性成分柚皮素进行含量测定的方法，所述柚皮素眼用组合物是各组份完全溶解的溶液，其每1000ml中包含：柚皮素10g、聚卡波菲10g、羟丙基-β-环糊精150g、泊洛沙姆407型2g、依地酸二钠1g、氯化钠2g、苯扎氯铵0.1g、酸碱调节剂适量以使该组合物最终的pH值在6.0-7.0范围内、和加至平衡量的水；

所述高效液相色谱法是照《中华人民共和国药典》2015年版四部第59页“0512高效液相色谱法”所载方法进行，并且包括以下测定过程或测定项目：

(1)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以甲醇为流动相A，0.2%磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱，具体梯度为：

0～10min期间25∶75～40∶60，10～25min期间40∶60～50∶50，25～45min期间50∶50～70∶30；

检测波长为280nm；理论板数按柚皮素峰计算应不低于3000；

(2)对照品溶液的制备：柚皮素对照品置五氧化二磷干燥器中干燥12h后，精密称取适量，加甲醇制成每1mL含柚皮素100μg的柚皮素对照品溶液；

(3)供试品溶液的制备：精密量取柚皮素眼用组合物1ml，置100ml量瓶中，加0.1mol/L无机碱2ml，混匀，在40°C水浴中温热30min，取出，冷却，加0.1mol/L盐酸2ml中和；接着加90%甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，制成每1mL含柚皮素100μg的溶液，作为供试品溶液；所述无机碱是碳酸氢钠或碳酸氢钾；

(4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定并计算每1ml柚皮素眼用组合物中柚皮素的含量，即得。

2.根据权利要求1的方法，其中所述柚皮素眼用组合物是滴眼液。

3.根据权利要求1的方法，其中所述柚皮素眼用组合物是滴眼液，并且其是通过包括以下步骤的方法制备得到的：

(i)取400ml注射用水，搅拌下加入10g聚卡波菲，溶胀2h以上，用浓度为2mol/L的NaOH溶液调pH值至6.0-6.5，热压灭菌消毒，作为溶液I备用；

(ii)取400ml注射用水，加入羟丙基-β-环糊精150g，搅拌溶解，加入柚皮素10g超声2h溶解；然后加入2g泊洛沙姆407，超声0.5h溶解；加入1g依地酸二钠、2g氯化钠和0.1g苯扎氯铵，搅拌溶解，作为溶液II备用；

(iii)不断搅拌下将溶液I和溶液II混合均匀，加入注射用水定容至1000ml，最后用过滤除菌的浓度为2mol/L的氢氧化钠溶液调pH值至6.0-7.0，充分搅拌均匀并灌装在滴眼液瓶中，每瓶装10ml。

4.根据权利要求1的方法，所用色谱柱是XB C18柱，其规格为4.6mm×250mm，5μm。