[发明专利]柚皮素眼用组合物的质量控制方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有抗视网膜光感受器细胞凋亡的柚皮素眼用组合物的质量控制方法。本发明特别地涉及一种柚皮素滴眼液组合物的质量控制方法。

背景技术

光感受器细胞指的是能感受光刺激，并产生冲动传向中枢神经的感觉细胞。人类的光感受器细胞主要有两种，分别是视杆细胞和视锥细胞。如果光感受器细胞凋亡则难以再生和修复，将导致多种难治性的致盲疾病，如视网膜色素变性(retinitis pigmentosa，RP)、糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)和视网膜脱离等。

光感受器细胞凋亡所引起的视网膜疾病可利用光动力疗法、玻璃体腔注射各种抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的药物等抑制新生血管形成、玻璃体视网膜手术等方法进行治疗。这些方法主要用于疾病的晚期，光动力疗法和玻璃体腔注射各种抗VEGF的药物可抑制病情进一步发展，但是操作复杂，需要定期到医院重复治疗。玻璃体视网膜手术使得各种复杂的视网膜脱离和DR得到了解剖上的完全复位，但由于疾病所致的光感受器细胞的凋亡尚无法逆转，从而也不能从根本上恢复患者的视功能。此外，还有基因治疗和视网膜移植术，这给光感受器细胞凋亡所引起的视网膜疾病的治疗带来了新的希望，但是这些方法处于试验阶段，仍不成熟。

目前，延缓光感受器细胞凋亡的药物主要是与光感受器细胞代谢相关的物质，如：(1)维生素A、牛磺酸和二十二碳六烯酸(DHA)，是目前用于干预RP异常生化代谢最常用的物质，这些物质在视网膜内含量高，参与光感受器细胞正常结构和功能维持及正常光电转化反应。研究发现大剂量的补充这些物质能够延缓RP等视网膜疾病的病程进展；2)神经营养因子如FGF、TGF等均能延缓光感受器细胞的凋亡，但作用持续时间不同，而且目前也是仅限动物试验阶段；(3)钙离子拮抗剂可以延缓rd鼠光感受器细胞凋亡的发展，但钙拮抗剂用于RP治疗的安全剂量如何确定，长期应用是否会对机体产生不良后果等，均待进一步研究。因此，对于光感受器细胞凋亡所引起的视网膜疾病，急待一种安全有效的药物出现。

柚皮素的化学名称为4’，5，7-三羟基黄酮(naringenin，4'，5，7-trihydroxyflavanone)，化学结构如下式(I)所示。柚皮素是一种黄酮类化合物，它广泛存在于葡萄和西红柿等植物中。柚皮素毒性很小，实验浓度下均无细胞毒性，长期毒理试验证明药物无毒性。柚皮素药理作用广泛，如抗肿瘤、抗炎、止咳化痰和降糖等等。

现代药理作用研究表明，柚皮素在眼科方面具有以下功效：1)增加眼部血流量。50μl浓度为1％的柚皮素滴眼液能显著增加新西兰兔眼球的脉络膜、虹膜和睫状体的血流量。由于眼部血流量和视网膜功能密切相关，因此柚皮素增加眼部血流量的作用可能有助于改善眼球缺血缺氧所造成的视网膜损伤和新生血管的生成。2)逆转眼部缺血造成的视网膜功能降低。阻断中央视网膜和后睫状体动脉30min引起视网膜缺血引起闪光视网膜电流图b波消失。30min新让视网膜得到血液供应，则闪光视网膜电流图b波将缓慢恢复，4小时后b波的振幅可恢复到正常值的30％左右。给大鼠预先腹腔注射柚皮素(10mg/kg)能显著加快闪光视网膜电流图b波的恢复，并且4小时后使闪光视网膜电流图b值恢复到正常值的55％。这个结果表明柚皮素能有效改善视网膜缺血引起的视网膜功能损伤。3)抑制脉络膜新生血管的生成。GeorgeChiou教授发现，浓度为1％的柚皮素滴眼液能够显著降低激光诱发大鼠眼脉络膜新生血管的形成。与模型对照组相比，柚皮素滴眼后2周和4周(3次/日)对脉络膜新生血管形成的抑制率高达47％和51％。4)柚皮素具有抗氧化作用，能逆转氧化剂所引起的脐静脉内皮细胞和视网膜色素上皮细胞的氧化损伤。5)眼部抗炎作用。LPS诱发Lewis大鼠葡萄膜炎，使房水中PGE2、NO和细胞数量生成增多。玻璃体内注射0.4、4和40μg/kg体重的柚皮素可剂量依赖性抑制PGE2和NO的生成，给药剂量为40μg/kg柚皮素也能减少进入房水中的细胞数量达38％。

CN102716117A(中国专利申请号201210228744.X，广州中医药大学)公开了柚皮素在制备抗视网膜光感受器细胞凋亡的药物中的应用，据信化合物柚皮素对视网膜光感受器细胞的光化学损伤具有保护作用，且能抗视网膜光感受器细胞的凋亡，可用于制备各种抗视网膜光感受器细胞凋亡药物，以利于提高人类的生存质量。