[发明专利]一种利用线粒体D-loop区特异区域鉴定鼋的标记引物及方法有效
| 申请号： | 201610170843.5 | 申请日： | 2016-03-24 |
| 公开（公告）号： | CN105713973B | 公开（公告）日： | 2019-04-26 |
| 发明（设计）人： | 朱新平;张新铖;赵建;李伟 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院珠江水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12Q1/6869;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州知友专利商标代理有限公司 44104 | 代理人： | 宣国华;马赟斋 |
| 地址： | 510380 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 线粒体 loop 特异 区域 鉴定 标记 引物 方法 | ||
1.一种利用线粒体D-loop区特异区域鉴定鼋的标记引物，其特征是，为以下引物组：
D1F：5’-ATTAATTCATGCTTGTAGGAC-3’
D1R：5’-CGGGGTAGGGGGTTTAG-3’。
2.一种利用线粒体D-loop区特异区域鉴定鼋的方法，其特征是，采用权利要求1所述引物组对待测样本的全基因组DNA进行PCR扩增，然后进行电泳，如能够获得两条鼋特异性多态性片段的条带，即判断待测样品的物种是鼋，反之则获得相反结果。
3.权利要求2所述的利用线粒体D-loop区特异区域鉴定鼋的方法，其特征是，所述PCR扩增反应的循环参数为：94℃解链4min，94℃变性30s，59℃退火30s，72℃延伸30s，30个循环，72℃延伸10min。
4.一种利用线粒体D-loop区特异区域鉴定鼋的方法，其特征是，采用权利要求1所述引物组对待测样本的全基因组DNA进行PCR扩增，然后进行电泳，切胶回收鼋特异性多态性片段进行连接载体测序，所得结果与已有鼋线粒体DNA对比，这样就可更加确切地判断待测样品的物种是否是鼋。
5.权利要求4所述的利用线粒体D-loop区特异区域鉴定鼋的方法，其特征是，所述PCR扩增反应的循环参数为：94℃解链4min，94℃变性30s，59℃退火30s，72℃延伸30s，30个循环，72℃延伸10min。
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