[发明专利]一种提高棘白菌素B产量的方法

权利要求书

1.一种提高棘白菌素B产量的方法，其特征在于所述方法为：以构巢曲霉CCTCCM2012300为生产菌株，将构巢曲霉CCTCCM2012300接种至添加有金属离子的发酵培养基中，在20～30℃、220～280rpm下培养7～12天，得到发酵液，发酵液经分离纯化得到棘白菌素B；所述发酵培养基质量终浓度组成为：甘油0.5～5％，蛋白胨0.5～5％，L-脯氨酸0.1～0.5％，甘露醇1～10％，黄豆饼粉1～10％，鸟氨酸0.1～0.5％，花生油0.5～5％，K₂HPO₄·3H₂O0.2～2％，溶剂为蒸馏水，pH值自然；所述金属离子添加终浓度为50～2000mg/L发酵培养基。

2.如权利要求1所述提高棘白菌素B产量的方法，其特征在于所述金属离子为锰、亚铁、钙、铜或镁中的一种或多种。

3.如权利要求1所述提高棘白菌素B产量的方法，其特征在于所述金属离子以氯化盐或硫酸盐的形式加入。

4.如权利要求1所述提高棘白菌素B产量的方法，其特征在于所述金属离子添加终浓度为50～600mg/L发酵培养基。

5.如权利要求1所述提高棘白菌素B产量的方法，其特征在于所述金属离子添加方法为：在构巢曲霉CCTCCM2012300发酵培养的0～72h时，向培养基中添加金属离子，每次添加终浓度为100～250mg/L，每隔6～24h添加一次，使金属离子终浓度达到50～2000mg/L。

6.如权利要求5所述提高棘白菌素B产量的方法，其特征在于所述每次添加终浓度为150～200mg/L，每隔8～12h添加一次。

7.如权利要求5所述提高棘白菌素B产量的方法，其特征在于所述添加次数为1～4次。

8.如权利要求1所述提高棘白菌素B产量的方法，其特征在于所述构巢曲霉CCTCCM2012300发酵前先进行斜面活化和种子培养，所述斜面活化方法为：将构巢曲霉CCTCCM2012300接种至斜面培养基，25～30℃培养24～48h，获得斜面菌体；所述斜面培养基终浓度组成为：土豆200g/L，蔗糖20g/L，琼脂粉20g/L，pH自然，溶剂为水；

所述种子培养为：将斜面菌体接种至种子培养基，25～30℃培养24～48h，获得种子液；种子培养基终浓度组成为：棉籽粉25g/L，葡萄糖10g/L，甘油10g/L，pH6.8～7.0，溶剂为蒸馏水。

9.如权利要求1所述提高棘白菌素B产量的方法，其特征在于所述发酵培养基终浓度组成为：甘油1％，蛋白胨0.9％，L-脯氨酸0.5％，甘露醇10％，黄豆饼粉4％，L-鸟氨酸0.5％，花生油2％，K₂HPO₄·3H₂O1％，溶剂为蒸馏水，pH6.8～7.0。