[发明专利]物种鉴别试剂盒和物种鉴别方法在审
申请号: | 201610183690.8 | 申请日: | 2016-03-28 |
公开(公告)号: | CN105603110A | 公开(公告)日: | 2016-05-25 |
发明(设计)人: | 颜学恒 | 申请(专利权)人: | 上海逍鹏生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 上海胜康律师事务所 31263 | 代理人: | 张坚 |
地址: | 201108 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 物种 鉴别 试剂盒 鉴别方法 | ||
1.一种物种鉴别试剂盒,其特征在于:包括一个聚合酶链式反应试剂、 一个阳性对照品、一个无菌水以及至少一种物种的专一性引物对。
2.根据权利要求1所述的物种鉴别试剂盒,其特征在于:有15种物种 的专一性引物对,所述15种物种的专一性引物对分别为兔、马、鸡、狗、 绿猴、猪、老鼠、大鼠、猫、人、恒河猴、牛、仓鼠、果蝇、鱼的专一性 引物对。
3.根据权利要求1或2所述的物种鉴别试剂盒,其特征在于:通过下 列步骤来确定物种的专一性引物对:
(1)选定待鉴别的物种:依照目前最常见混杂的样品,选定待鉴别的 物种。
(2)比对基因库:搜寻基因库,比对待鉴别物种的异同,选定各物种 专一的检测基因序列作为引物。
(3)设计引物:选定检测基因序列作为引物,设计聚合酶链式反应所 用引物,需考虑专一性、灵敏度,以及各种反应条件。
(4)以细胞株模拟物种进行专一性测试:引物设计完成后,以细胞株 进行模拟测试专一性,如专一性不足,则重新设计引物。
(5)以阳性对照质粒验证灵敏度:引物专一性达标后,以阳性对照质 粒来检测引物灵敏度,目标100颗细胞即可检测,如果灵敏度不足,则重 新设计引物。
(6)以细胞株模拟物种进行专一性测试:引物专一性与灵敏度皆达标 后,以细胞株相互混合,模拟物种混杂,测试引物的鉴别效能。
4.一种物种鉴别方法,其特征在于:该鉴别方法采用权利要求1或2 的所述物种鉴别试剂盒,其步骤为:
(1)将待测细胞与各个物种的专一性引物对进行PCR反应;
(2)将PCR反应产物进行跑胶,获得PCR反应产物大小;
(3)根据PCR反应产物大小鉴别出待测细胞物种。
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