[发明专利]一种灵芝蛋白肽-硒螯合物的制备方法

权利要求书

1.一种灵芝蛋白肽-硒螯合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）灵芝蛋白提取：利用碱溶酸沉法或用硫酸铵沉降法提取灵芝蛋白；所述碱溶酸沉法的具体操作如下：首先将灵芝超微粉碎，将粉碎后的灵芝与蒸馏水混合，利用NaOH或KOH溶液调节pH至8.0-10.0，超声提取后进行水浴提取，提取后过滤，滤液为碱提的灵芝蛋白溶液，用盐酸调节碱提的灵芝蛋白溶液pH至2.0-5.0进行蛋白沉淀，离心得沉淀蛋白，水洗至中性再次离心，将沉淀冷冻干燥即得灵芝蛋白；所述硫酸铵沉降法的具体操作如下：首先将灵芝超微粉碎，将粉碎后的灵芝与蒸馏水混合，逐步加入固体硫酸铵使硫酸铵的饱和度达40-60wt%，离心得灵芝蛋白沉淀，利用透析法脱盐后冷冻干燥得灵芝蛋白；

（2）酶解：将步骤（1）得到的灵芝蛋白溶解在水中使蛋白质量浓度达1.0-5.0wt%，用NaOH或KOH溶液调节pH至7.0-11.0，温度保持在40-80℃，加入蛋白酶水解30-90min，灭酶，得到灵芝蛋白多肽复合物溶液；

（3）多肽-硒螯合物制备：利用固体高温混合法或者液体螯合法制备灵芝蛋白肽-硒螯合物；所述固体高温混合法的具体操作如下：将步骤（2）得到的灵芝蛋白多肽复合物溶液冷冻干燥制成灵芝蛋白多肽复合物冻干粉，并加入亚硒酸钠粉末混合，300-500℃加热制备灵芝蛋白肽-硒螯合物；所述液体螯合法的具体操作如下：往步骤（2）得到的灵芝蛋白多肽复合物溶液中加入亚硒酸钠溶液，搅拌均匀，调节pH为5.0-10.0，在30-80℃条件下持续反应0.5-2.0h，反应后冷却，离心分离去除杂质，加入3-5倍体积75-95wt%的乙醇，沉淀静置12h以上，离心去除上清液，获得灵芝蛋白肽-硒螯合物；

（4）将步骤（3）得到的灵芝蛋白肽-硒螯合物进行冷冻干燥。

2.根据权利要求1所述一种灵芝蛋白肽-硒螯合物的制备方法，其特征在于：步骤（1）碱溶酸沉法操作中灵芝与蒸馏水以w/v为1:20-80的比例混合；硫酸铵沉降法操作中灵芝与蒸馏水以w/v为1:20-60的比例混合。

3.根据权利要求1所述一种灵芝蛋白肽-硒螯合物的制备方法，其特征在于：步骤（1）和步骤（2）中NaOH或KOH溶液的质量分数为1.0wt%-5.0wt%。

4.根据权利要求1所述一种灵芝蛋白肽-硒螯合物的制备方法，其特征在于：步骤（1）碱溶酸沉法操作中超声提取时间为10-50min，超声功率为100-200W；水浴提取时间为60-120min，温度60-100℃。

5.根据权利要求1所述一种灵芝蛋白肽-硒螯合物的制备方法，其特征在于：步骤（1）中离心沉淀处理条件为：离心速率为3500-5000r/min，离心时间为5-20min。

6.根据权利要求1所述一种灵芝蛋白肽-硒螯合物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中蛋白酶为碱性蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶中的一种，蛋白酶的质量浓度为1.0-5.0wt%。

7.根据权利要求1所述一种灵芝蛋白肽-硒螯合物的制备方法，其特征在于：步骤（3）固体高温混合法操作中亚硒酸钠粉末和灵芝蛋白多肽复合物冻干粉按照亚硒酸钠粉末：灵芝蛋白多肽复合物冻干粉=1:6-5:6的质量比混合；液体螯合法操作中亚硒酸钠溶液和灵芝蛋白多肽复合物溶液按亚硒酸钠溶液：灵芝蛋白多肽复合物溶液=1:6-5:6的体积比混合，亚硒酸钠溶液的浓度为.5-5mol/L。